Анализ пцр кровь мазок как берется

Анализ пцр кровь мазок как берется

ПЦР анализ у мужчин – один из самых информативных методов диагностики инфекционных заболеваний. Он предполагает обнаружение заданного фрагмента ДНК в клиническом материале.

Как делают анализ ПЦР у мужчин?

Анализы методом ПЦР у мужчин базируются на определении бактериальной, вирусной, грибковой ДНК. Заданный фрагмент нуклеотидной последовательности обнаруживается и многократно копируется.

Исследование включает такие этапы:

  • Выделение ДНК (подготовка полученного от пациента клинического материала для исследования).

  • Амплификация ДНК (множественное копирование нуклеотидной последовательности).
  • Детекция – отделение продуктов амплификации путем добавления в смесь флуоресцирующих (светящихся) веществ.

Преимущества метода:

  • высокая чувствительность – положительный результат возможен даже при наличии 10-100 клеток в биоматериале;
  • высокая специфичность – обнаруживается только определенная последовательность ДНК, характерная для одного возбудителя инфекции;
  • прямое определение инфекционного агента, а не выявление косвенных признаков его пребывания в организме;
  • может использоваться любой биоматериал, полученный инвазивным или неинвазивным способом;
  • на диагностику требуется лишь несколько часов.

ПЦР анализ – как его берут у мужчин?

Как берется анализ ПЦР у мужчин, зависит от того, какой клинический материал он сдает.

В свою очередь тип биоматериала определяется:

  • клиническими признаками болезни;

  • подозрением на определенную инфекцию.

Чаще всего проводится ПЦР мазка у мужчин на урогенитальные инфекции. Его берут из уретры специальным зондом. Эта процедура в нашем медицинском центре проходит безболезненно. Собранный биоматериал помещается в транспортную среду и отправляется в клиническую лабораторию.

Альтернативой соскобу из уретры может служить другой клинический материал из органов мочеполовой системы. Часто проводится ПЦР в сперме у мужчин. В эякуляте может быть обнаружена инфекция в случае поражения яичек или придатков.

Нередко назначается ПЦР мочи у мужчин. Это исследование используется при подозрении на локализацию инфекции в мочевыделительной системе (почки, мочевой пузырь, мочеточники). Кроме того, оно позволяет заменить соскоб из уретры, если человек отказывается сдавать клинический материал. Часто пациенты спрашивают, чем отличается ПЦР мочи и мазка у мужчин. Отличия незначительные, но они все же существуют. Мазок более информативен, так как позволяет обнаружить возбудителей вирусных инфекций, например, ВПЧ. Моча же используется главным образом для диагностики ИППП бактериальной, грибковой или протозойной этиологии.

ПЦР секрета простаты у мужчин используется при подозрении на простатит. Биоматериал получают после ручной стимуляции предстательной железы. Несколько капель выделившегося через уретру секрета врач собирает в специальный контейнер. Если секрет не выделяется, это означает, что его количество низкое.

Тогда врач просит пациента помочиться и собрать первую порцию мочи. Она вымывает секрет простаты и в нем может быть обнаружена ДНК возбудителя инфекции. Иногда используется ПЦР мазок из ануса у мужчин.

Он необходим в таких случаях:

  • при наличии кондилом в аноректальной области;
  • при однополых сексуальных контактах в анамнезе (для диагностики проктита, вызванного возбудителями половых инфекций);
  • при обнаружении клинических признаков проктита.

ПЦР мазок изо рта у мужчин врач может взять для диагностики:

  • герпеса 1 или 2 типов;
  • папилломавирусной инфекции;
  • кандидоза;
  • половых инфекций (при наличии симптомов фарингита или тонзиллита).

В настоящее время для диагностики различных заболеваний создано огромное количество методов. Все они имеют свои как положительные, так и отрицательные стороны. Некоторые из них хорошо подходят для определения одних маркеров или микроорганизмов, в то же время их бесполезно проводить при диагностике других заболеваний. В силу этого была создана одна методика, которая имеет довольно высокую чувствительность ко многим возбудителям и к различным молекулам. Для такой точной диагностики используется полимеразная цепная реакция.

Данную реакцию можно проводить всем без исключения людям. Для проведения этой реакции необходим биологический материал для исследования. Мужские анализы:

  • кровь;
  • мужской мазок слюны;
  • мужской мазок спермы.

У женщин же для исследования чаще всего забирают, помимо крови и слюны, выделения из половых путей. И у тех, и у других для исследования можно использовать специальные мазки-слепки с поверхности слизистых оболочек различных органов.

Как берут анализ ПЦР у мужчин: особенности методики

Конечным результатом, получаемым в результате этой процедуры, являются определенные участки ДНК. Для того чтобы их получить, необходим определенный минимальный набор компонентов:

  1. Исследуемый материал или мазок на ПЦР. Как было сказано выше, для проведения полимеразной цепной реакции необходимо наличие биологического материала или мазка у мужчин, в котором будут содержаться участки ДНК нужного нам возбудителя. Поэтому и используются для исследования мазки и соскобы, кровь (чаще всего используется венозная). Немного реже для исследования берут содержимое различных гнойников или новообразований.
  2. Праймеры. Под праймерами понимают определенные точки (стартовые и конечные), которые необходимы для синтеза нужной ДНК в определенных условиях. Для исследования обычно берут 2 праймера, действие которых — достраивание нуклеотидов к цепям.
  3. ДНК-полимераза. Этот фермент является решающим в проведении ПЦР. Его действие направлено на образование необходимой для исследования и уточнения цепи ДНК. Фермент работает в определенных условиях (крайне важным и необходимым является то, что он должен быть устойчив к воздействию высоких температур, из-за чего его получают от бактерий, активных только при такой окружающей среде).
  4. Ионы магния. Они нужны для нормальной активности фермента, т.е. они выступают в роли катализатора химической реакции синтеза ДНК на полученных участках.
  5. Среда, в которой будут проходить необходимые реакции. Чаще всего используется буферный раствор с определенной плотностью, кислотностью и ионным составом.
  6. Некоторые физические факторы, такие как: давление, температура раствора и окружающей среды, влажность.

Как проходит реакция

Под действием практически всех вышеперечисленных компонентов реакции из биологического материала (мужской анализ) выделяются интересующие нас компоненты ДНК (если таковые имеются). При их наличии реакция продолжается; если же их нет, результат реакции считается отрицательным. Если в биологическом материале присутствует ДНК микроорганизма, начинается реакция амплификации. Как известно, нить ДНК состоит из двух цепей, идущих параллельно друг другу.

Во время реакции амплификации происходит разделение данных цепей на 2 параллельно идущие цепочки нуклеотидов.

На каждую из них садится праймер, основная цель которого под действием имеющейся ДНК-полимеразы образовать еще одну, идентичную той, что была в растворе сначала, нить ДНК. Таких нитей, синтезируемых в реакции, может образовываться крайне много; единственное же условие их образования — соответствие определенным условиям.

Условно протекание ПЦР-реакции можно разделить на несколько периодов. В первом периоде денатурации происходит разделение ДНК под действием высокой температуры (чаще всего выше 95 градусов). После того как цепи ДНК станут одноцепочечными, начинается вторая стадия — стадия отжига. Суть данной стадии заключается в понижении температуры среды для того, чтобы праймеры могли присоединиться к нитям ДНК и начать синтез. Чаще всего эта стадия занимает не более 30 секунд, хотя доказано, что за это время успевает синтезироваться довольно большое количество нуклеотидов.

На третьей стадии, элонгации, происходит полная достройка нужных компонентов каждой из цепей. В конце реакции наступает фаза плато, которая обуславливается снижением скорости синтеза всех цепей, достройкой всех одно цепочечных фрагментов. Время ее наступления, а также длительность фазы элонгации обусловлены количеством имеющихся реагентов.

Для чего же проводится эта реакция

Областей, в которых чаще всего используют данную реакцию, довольно много. Она получила свое распространение в таких сферах, как:

  • криминалистика (установление наличия следов преступления и доказательство вины преступника, взяв мужской анализ ПЦР или женский);
  • генетика (проведение тестов на отцовство, исследование и установление родственных связей);
  • сфера инфекционных заболеваний (выявление в исследуемом материале частиц микроорганизмов либо продуктов их жизнедеятельности и активности);
  • персонализационная медицина (позволяет выявить наличие у человека непереносимости различных лекарств непосредственно еще до их применения и частично исследовать чувствительность организма человека и содержащихся у него бактерий к действию тех или иных антибиотиков);
  • научная деятельность (становится возможным исследование роста различных образований в условиях invitro, что в дальнейшем способствует уточнению различных данных относительно роста и функциональной способности опухолей).

Когда используют этот метод

Уникальность реакции ПЦР состоит в том, что прямых непосредственных противопоказаний к ее проведению нет. Сама же реакция проводится в таких случаях:

  1. Отрицательные или неправильные результаты, полученные при исследовании другими методами. Многие реакции не могут дать полного и развернутого ответа на все интересующие вопросы, а некоторые так и вовсе бесполезны (например, при диагностике атипичных форм малярии, когда возбудитель есть, а клиника неявная или отсутствует). В таком случае и прибегают к проведению ПЦР.
  2. Использование для диагностики различных частиц и фрагментов, взятых после антибиотикотерапии. Часто в результате лечения антибиотиками в организме может оставаться некоторое количество микроорганизмов. Так как их мало, то реакции они могут и не вызывать, однако наличие подобного “контейнера” способствует увеличению риска развития рецидивов заболевания. После лечения низко чувствительными методами такие микроорганизмы не всегда удается обнаружить, и тогда на помощь и приходит ПЦР.
  3. Замена более дорогостоящих процедур. ПЦР сама по себе является довольно затратной процедурой, однако иногда ее проведения достаточно для уточнения диагноза того или иного заболевания без использования еще более дорогих, а часто и более бесполезных методов.
  4. Выявление многих заболеваний, передающихся от партнера к партнеру во время половых сношений. Обуславливается использование ПЦР при диагностике венерических заболеваний тем, что многие возбудители ИППП довольно долгое время себя не проявляют. Исследование мазков-отпечатков со слизистых половых путей и мочеиспускательного канала позволяют выявить их еще до развития клинической картины и начать необходимое лечение как можно раньше.
  5. Уточнение онкологической составляющей. У многих пациентов с онкологией не всегда удается определить наличие тех или иных онкомаркеров. ПЦР позволяет выявить наличие либо онкомаркеров, либо дефектных клеток, что значительно повышает точность диагностики опухолей.

Анализ на ПЦР является универсальным методом диагностики. Высокая чувствительность и точность данной реакции делают ее использование необходимой при многих заболеваниях и состояниях. Единственным ее минусом может считаться довольно высокая затратность. Поэтому не каждый мужчина по собственному желанию может себе ее позволить. Для наиболее правильных результатов и точной их интерпретации необходимо строго соблюдать все необходимые условия для данной реакции, так как тогда существенно возрастает риск получения неправильных цепей ДНК и как следствие всего — неправильная интерпретация результатов, которые покажет анализ.

Что значит назначение вам ПЦР анализа? Эта аббревиатура расшифровывается как метод полимеразной цепной реакции – это особый способ проведения лабораторных исследований. При данном методе полученный от пациента биологический материал размещается в специальном аппарате. К исследуемой среде прибавляют набор ферментов-реактивов, которые помогают воспроизводить генетический материал возбудителя (вируса или микроба). При реакции воспроизводится большое количество копий ДНК или РНК, что позволяет идентифицировать путем сравнения с базой данных как вирусную, так и микробную инфекцию.

Что означает результат ПЦР анализа? Если в организме человека имеется возбудитель каких-либо инфекций, даже скрытый, при данном анализе будет выявлено не только его наличие, но и в каком количестве данная инфекция присутствует в теле.

Для анализа на инфекции методом ПЦР можно исследовать все биологические жидкости организма – кровь, моча, слюна, выделения половых органов, слизь горла и носа. Для анализа требуется совсем немного материала, так как если возбудители имеются, за счет воспроизведения их копий, концентрация генетической информации доводится до такой, которая выявит микроб или вирус, и определит его вид. Точность анализа ПЦР очень высока, при помощи данного анализа можно на сегодня определить практически все широко распространенные вирусные, микробные и иные инфекции.

Но, что же чаще всего выявляет анализ ПЦР? К списку инфекций, которые можно выявить данным методом можно отнести инфекционные, в том числе и социально опасные инфекции по типу туберкулеза или гепатитов В и С. Этим же методом можно выявить ВИЧ-инфекцию, хламидийную и уреаплазменную инфекции, микоплазмоз как респираторной системы, так и генитальный. При помощи данного анализа выявляют молочницу, бактериальный вагиноз, трихомониаз. Возможности данного метода позволяют выявлять скрытые инфекции – герпес разных типов, ВПЧ (папилломавирус), а также выявление особого микроба, ответственного за развития язв желудка – хеликобатера.

Сегодня сдать анализ методом ПЦР можно практически в любой частной или государственной лаборатории. Данные виды анализов проводят всем, детям и взрослым. В зависимости от того, какую цель преследует анализ, в зависимости от пола проводятся анализ разного биологического материала.

Так, анализ ПЦР у мужчин проводит по крови или моче, секрету уретры, слизи из глотки или носа, соку простаты или даже сперме. Проведение анализа ПЦР у женщин возможно в крови и моче, влагалищном секрете, выделениях из уретры, слизи носа и глотки.

Очень часто применяют анализ ПЦР при беременности, с его помощью во влагалищном секрете или крови выявляют скрытые инфекции, требующие особого наблюдения в этот период, а иногда и адекватного лечения.

ПЦР как берут анализ

Анализ на инфекции данным методом назначает врач, зачастую сбор материала проводится сразу в кабинете доктора – уролога или гинеколога. Как делается анализ ПЦР?

Исследуемый материал в лаборатории смешивают с реактивами и ждут реакции. При наличии возбудителей, копии их ДНК или РНК размножаются. Выявленные фрагменты генетического материала аппарат сравнивает с базами данных и точно выявляет возбудителя инфекции. Пи необходимости, также указывается и количество возбудителя в тех или иных жидкостях тела. Обычно исследование длится не более 1-2 суток, при необходимости – проводят экспресс-анализы.

Откуда берут анализ ПЦР? Это будет зависеть от того, какие виды возбудителя предполагаются. Если это ВИЧ или гепатиты – берется кровь, если это половые инфекции – берется мазок с уретры или влагалища. При подозрении на мононуклеоз или герпес берут мазок с горла. Также могут использоваться моча, спинномозговая жидкость, отделяемое из ран, мокрота и тд.

Анализ крови ПЦР

Для точных результатов и диагностики инфекций важно сдавать кровь в утренние часы натощак. Анализ крови методом ПЦР способен выявить возбудителей опасных заболеваний – ВИЧ, гепатиты, сифилис. В периоды обострения и активности вируса в крови могут быть выявлены вирусы герпеса, папилломы и некоторые другие.

ПЦР анализ: подготовка

Для абсолютной точности анализа важна правильная к нему подготовка. Проще всего подготовиться к анализу крови, никаких ограничений в диете или активности нет, кровь нужно сдать утром, натощак. Анализ мочи сдают после подмывания гениталий, из средней порции в специальный стерильный контейнер. Анализ ПЦР из половых путей заслуживает особого внимания, поэтому важно знать, как подготовиться. За сутки до обследования запрещается секс, перед исследованием рекомендовано не мочиться. При менструации у женщин, дата анализа переносится на 3-5 дней с момента последних выделений.

Сколько времени делается анализ ПЦР

Анализ в зависимости от возможности лаборатории может готовиться от нескольких часов до нескольких дней. В среднем, сколько дней делается анализ ПЦР? Обычно это одни –двое суток. При экстренной ситуации анализ может быть выполнен в этот же день, через несколько часов.

Расшифровка анализа ПЦР

Данные этого анализа очень точные, в отличие от многих других методов. Что показывает ПЦР анализ? Положительный результат говорит о наличии в организме и отдельных биологических жидкостях того или иного возбудителя. Отрицательный результат указывает на отсутствие инфекции. Результаты ПЦР анализа максимально точны, при нем практически не бывает ложно-положительных или ложно-отрицательных результатов. Если микроб или вирус есть (даже в очень минимальном количестве), при реакции их ДНК или РНК размножится. Если же возбудителей нет, тогда и реакции просто не будет.



Источник: www.PrishLek.ru


Добавить комментарий