Газохроматографический метод анализа крови

Газохроматографический метод анализа крови

Приведенный ниже текст получен путем автоматического извлечения из оригинального PDF-документа и предназначен для предварительного просмотра.
Изображения (картинки, формулы, графики) отсутствуют.

                                 GAS CHROMATOGRAPHY              ГАЗОВАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ                             IN MEDICINE                             K. N. ZELENIN                                                             В МЕДИЦИНЕ                                                             д. з. бЦгЦзаз                             One of modern analytical                                                             ЗУВММУ-ПВ‰ЛˆЛМТН‡fl ‡Н‡‰ВПЛfl, л‡МНЪ-иВЪВ ·Ы „                             methods, the method of                             gas chromatography, is                             described. The capabili-                   Введение. Знакомство школьников с аналитиче-                                                                    скими химическими методами обычно ограничива-                             ties of this method are                                                                    ется отдельными пробирочными реакциями. Меж-                             illustrated with its applica-          ду тем современный арсенал физико-химических                             tions to clinical and bio-             методов анализа чрезвычайно широк, а чувстви-                                                                    тельность и избирательность многих из них могут                             logical tasks.                                                                    поразить воображение даже искушенного специа-                                                                    листа. Цель статьи – ознакомиться с одним из со-                             к‡ТТП‡Ъ Л‚‡ВЪТfl У‰ЛМ                   временных аналитических методов и получить                                                                    представление о том, какие возможности метод дает                             ЛБ ТУ‚ ВПВММ˚ı ‡М‡ОЛ-                  хотя бы в одной из практических областей. Для это-                             ЪЛ˜ВТНЛı     ЛМТЪ ЫПВМ-                го выбран метод газовой хроматографии в приложе-                             Ъ‡О¸М˚ı ПВЪУ‰У‚ – ПВ-                  нии к медицинским проблемам.                             ЪУ‰ „‡БУ‚УИ ı УП‡ЪУ„ ‡-                    Хроматография включает группу аналитических                                                                    методов, применяемых для разделения смесей со-                             ЩЛЛ. ЗУБПУКМУТЪЛ ПВ-                   единений на основании определенных физических                             ЪУ‰‡ ЛОО˛ТЪ Л Ы˛ЪТfl                    свойств отдельных веществ. Принцип, лежащий в                             В„У Ф ЛПВМВМЛВП ‚ ПВ-                  основе процесса, – избирательное распределение                                                                    компонентов смеси между двумя несмешивающи-                             ‰ЛНУ-·ЛУОУ„Л˜ВТНЛı ЛТ-                 мися фазами: подвижной и неподвижной. Непо-                             ТОВ‰У‚‡МЛflı.                           движной фазой могут быть твердое вещество или                                                                    жидкость, закрепленная на пористом носителе, а                                                                    подвижной – жидкость или газ.                                                                        Честь открытия хроматографии принадлежит                                                                    русскому ботанику М.С. Цвету, который в 1903 году                                                                    впервые разделил растительные пигменты. Тогда                                                                    Цвет писал: “Следовало ожидать ... что всевозмож-                                                                    ные порошкообразные вещества окажут воздейст-                                                                    вие на хлорофилловые пигменты в лигроиновых                                                                    растворах, и возникла надежда, что систематичес-                                                                    кое изучение вопроса бросит некоторый свет на                                                                    сущность адсорбционных явлений и позволит вы-                                                                    работать на их основании новый метод физического                                                                    отделения веществ”. Вот как в 1942 году англий-                                                                    ский химик Стрейн оценил открытие Цвета: ”Был                                                                    предложен новый остроумный метод химического                                                                    анализа, которому предназначено оказать влияние                                                                    на жизнь человечества и всего живого мира”. Не-                                                                    удивительно, что другой английский химик предла-                                                                    гал назвать этот метод “цвет-анализом”, чтобы от-                                                                    дать должное М.С. Цвету. Принятое название      © бВОВМЛМ д.з., 1996                                                                        метода “хроматография” в переводе с греческого                                                                    означает “цветопись” и перекликается с именем                                                                    первооткрывателя.                                                                        К настоящему времени разработано множество                                                                    видов хроматографических техник: колоночная,                                                                    тонкослойная, бумажная, ионообменная, весь                                                                    спектр электрофоретических методов, аффинная                                                                    хроматография, высокоэффективная жидкостная,   20                                                                    лйкйлйЗлдав йЕкДбйЗДнЦгъзхв ЬмкзДг, ‹11, 1996   сверхкритическая жидкостная и, наконец, газовая        хроматографические колонки, детектор, система хроматография. Впервые идея использования газа в       регистрации и обработки данных. качестве подвижной фазы была высказана Марти-             Испаритель служит для перевода жидкой пробы ном и Синджем (1941 год), а практически реализо-       в паровую фазу. Объем жидкой пробы, вводимой вана Джеймсом и Мартином (1952 год) в разделе-         шприцем-дозатором, не превышает 10 микролитров. нии летучих жирных кислот.                                                           Сердце газового хроматографа – хроматографи-    В чем суть метода? Газовая хроматография –          ческая колонка. Существуют два основных типа ко- универсальный метод разделения смесей разнооб-         лонок: насадочные и капиллярные. Насадочные разных веществ, испаряющихся без разложения.           колонки представляют собой стеклянные или ме- При этом компоненты разделяемой смеси переме-          таллические трубки длиной от 1 до 5 м со внутрен- щаются по хроматографической колонке с потоком         ним диаметром от 1,5 до 5 мм. Они заполнены “на- инертного газа (газа-носителя). Разделяемая смесь      садкой” – твердой основой с нанесенной на нее многократно распределяется между газом-носите-         неподвижной фазой. В качестве твердой основы ис- лем (подвижной фазой) и нелетучей неподвижной          пользуются различные пористые вещества, на по- жидкой фазой, нанесенной на инертный материал          верхности которых должна образоваться тончайшая (твердый носитель), которым заполнена колонка.         пленка неподвижной фазы. Принцип разделения – неодинаковое сродство ор-            Можно использовать саму стенку колонки как ганических веществ к летучей подвижной фазе и          твердую основу. Тогда речь идет о капиллярной ко- стационарной фазе в колонке. Компоненты смеси          лонке. Технология изготовления капиллярной ко- селективно удерживаются неподвижной фазой, а           лонки – это нанесение на стенку длинного капил- затем выходят из колонки и регистрируются детек-       ляра из кварцевого стекла (как правило, до 30 м) тором. Сигналы детектора записываются в виде           тончайшего слоя неподвижной фазы. Эта техноло- хроматограммы автоматическим потенциометром            гия позволила существенно улучшить параметры (самописцем) или же регистрируются на экране           разделения смесей. У капиллярных колонок пред- компьютера. Эффективность разделения смеси рас-        почтение отдают малым диаметрам (0,25 мм). тет с увеличением числа элементарных актов рас- пределения веществ между подвижной и неподвиж-            Число стационарных фаз безгранично. Для вы- ной фазами.                                            полнения хроматографического анализа необходи-                                                        мо подобрать характеристики колонки. Наиболее    Разделение многокомпонентных проб и их реги-        важный этап – выбор стационарной фазы. Непо- страция находят применение в нефтяной, метал-          движная фаза должна соответствовать следующим лургической, химической, фармацевтической, пи-         критериям: химическая стойкость, низкое давление щевой и других отраслях промышленности. С              пара в диапазоне рабочих температур колонки, до- повышением экологических требований к среде            статочные коэффициенты распределения, доста- обитания, продуктам, лекарствам можно ожидать          точная селективность по отношению к исследуе- еще более широкого внедрения газовой хромато-          мым веществам, низкая вязкость. В повседневной графии в повседневную жизнь. Оправдано и понят-        практике используются сотни жидких фаз, облада- но применение газовой хроматографии в рутинном         ющих хорошими коэффициентами разделения к анализе, например бензина или природного газа.         различным классам веществ. Жидкая фаза наносит-    Устройство газового хроматографа. Газовый хро-      ся на твердый носитель, обладающий большой матограф отличается замечательной простотой. Не-       удельной поверхностью, прочный и химически смотря на многочисленные усовершенствования,           инертный. Чаще всего это особым образом подго- ключевые компоненты его конструкции неизмен-           товленные диатомитовые земли или полимерные ны (рис. 1). Основные узлы газового хроматографа       адсорбенты. следующие: источник газа-носителя и блок подго-           Температуру и скорость газа-носителя можно варь- товки газов, испаритель, термостат колонок и сами      ировать в широких пределах. Использование легких                                                        газов-носителей (гелий) ускоряет анализ, а относи-                                                        тельно тяжелых (азот) улучшит качество разделения         1     2           3           4   6            в ущерб скорости. Скорость газа выбирают экспе-                     7                                  риментально для удовлетворительного разделения                                                        компонентов смеси и максимального ускорения ана-                                   5                    лиза. Так как характер разделения находится в зави-             Проба                                                        симости от температуры, хроматографическая ко-                                                        лонка размещается в программируемом термостате.    Рис.1. Принципиальная схема газового хромато-       Разделение смеси веществ с широким диапазоном    графа: 1 – газ-носитель, 2 – испаритель, 3 – хро-   температур кипения начинают при низкой темпера-    матографическая колонка, 4 – детектор, 5 – само-    пишущий регистратор, 6 – измеритель скорости        туре термостата, а затем программируют постоянное    потока, 7 – термостат.                              повышение температуры для элюирования высоко-                                                        кипящих компонентов. Казалось бы, с увеличением   бЦгЦзаз д.з. ЙДбйЗДь пкйеДнйЙкДоаь З еЦСасазЦ                                                                21        длины колонки и уменьшением скорости передви-          Сигнал, мв      жения эффективность разделения должна возрас-                    tR А      тать. На практике, однако, при этом вещества раз-                                                                                          tR Б      мываются из-за диффузии. Поэтому существует      оптимальный компромисс между эффективностью                               ω      работы колонки, диффузией и временем анализа.                       h/2         Выбор детектора – ключ к успеху. Эволюция га-                          А                       Б      зовой хроматографии во многом – история совер-                                                   Время, мин      шенствования способов детектирования. Детектор         Ввод пробы      фиксирует изменение какого-либо физического              Рис. 2. Типичная хроматограмма. А, Б – пики со-      свойства газа-носителя при попадании в поток ис-         ответствующих компонентов, tR A и tR Б – время      следуемого вещества. В настоящее время в практике        удерживания соединений А и Б, h /2 – полувысота      газовой хроматографии применяются следующие              пика А, ω – ширина пика А на его полувысоте.      основные виды детекторов: детектор по теплопро-      водности (катарометр), пламенно-ионизационный            Определение количественного состава смеси ос-      детектор, термоионный детектор, детектор элек-        новано на допущении того, что интенсивность пика      тронного захвата, масс-спектрометр. Кроме того,       каждого компонента пропорциональна его содер-      достаточно широко применяются фотоионизаци-           жанию в смеси. В качестве меры интенсивности      онный детектор, детектор хемилюминесценции,           принимается площадь пиков S. Обычно для этого      атомно-эмиссионный детектор, спектрофотомет-          умножают его высоту h на ширину ω, измеренную      рические детекторы.                                   на полувысоте пика: S = hω .Конкретным примером          Выбор детектора принципиально важен для ана-      хроматограммы может служить хроматограмма сме-      лиза биологических проб. Критериями выбора яв-        си карбоновых кислот (рис. 3). Анализ данных в со-      ляются чувствительность и диапазон применения.        временных хроматографах автоматизирован. Как      Катарометр позволяет определить вещество, содер-      правило, полученные данные обрабатываются ЭВМ,      жание которого в пробе составляет 10− 3%. Чувстви-    сопоставляются с базами данных, подвергаются      тельность ионизационных детекторов к органичес-       статистической обработке.      ким веществам значительно выше (10− 8%). Для             Хромато-масс-спектрометрия – новый этап. При-      термоионного детектора чувствительность по отно-      менение масс-спектрометра в качестве детектора      шению к фосфорсодержащим соединениям возрас-      тает еще на 3–4 порядка. Электронозахватный де-      тектор практически нечувствителен к соединениям                           2      без атомов галогенов, зато по отношению к полига-      логенпроизводным на 2–3 порядка чувствительнее,      чем ионизационно-пламенный детектор. Таким об-                      1      разом, при правильном выборе колонки, детектора                                 3          4      и с учетом малого объема пробы предел обнаружения      веществ методом газовой хроматографии составля-      ет 10−12–10−13 г, что превосходит многие другие ме-      тоды анализа.         Что такое хроматограмма? Каждому компоненту      смеси на хроматограмме соответствует отдельный      пик (рис. 2). Время от начала хроматограммы до      появления вершины пика называется временем      удерживания (tR). При строгом воспроизведении            Рис. 3. Хроматограмма смеси карбоновых кис-      всех условий время удерживания является такой же         лот: 1 – уксусная, 2 – пропионовая, 3 – масляная,                                                               4 – валериановая.      физико-химической характеристикой вещества,      как его плотность, показатель преломления и т.д.         Определение качественного состава смеси про-       газового хроматографа явилось событием такого      водится путем сопоставления времени удерживания       масштаба, что потребовало самостоятельного наи-      данного компонента и эталона – вещества извест-       менования. Эта комбинация называется хромато-      ной структуры. Совпадение времени удерживания         масс-спектрометрия. Масс-спектрометр обладает      эталона и определяемого компонента может указы-       способностью не только зарегистрировать появле-      вать на их идентичность. Эталон чаще всего добав-     ние в нем разделяемого компонента, но и устано-      ляется в исследуемую смесь (метод метки). При         вить его структуру. Широкое применение хромато-      этом число пиков на хроматограмме не должно из-       масс-спектрометров вызвало необходимость созда-      меняться, а интенсивность пика одного из компо-       ния гигантских библиотек – баз данных масс-спек-      нентов должна увеличиваться.                          тров всевозможных соединений. Итак, в методе   22                                                           лйкйлйЗлдав йЕкДбйЗДнЦгъзхв ЬмкзДг, ‹11, 1996   газожидкостной хроматографии (ГЖХ) широко ва-          ганизмов, обладающих способностью к быстрому рьируются температура, скорость газа-носителя,         росту, эти этапы исследования занимают не менее параметры хроматографической колонки, жидкая           двух суток. С помощью газовой хроматографии фаза, тип детектора. Это создает совершенно уни-       можно проводить ускоренную (менее двух часов) кальные условия для решения различных аналити-         идентификацию микроорганизмов по спектру спе- ческих задач.                                          цифических компонентов их мембран или специ-                                                        фическим продуктам пиролиза. еВ‰ЛˆЛМТНЛВ Ф ЛОУКВМЛfl                                                           Угроза газовой гангрены. Каждый двадцатый ра- „‡БУ‚УИ ı УП‡ЪУ„ ‡ЩЛЛ                                                        неный в годы второй мировой войны страдал от     Газовая хроматография используется во многих       гнойно-септических осложнений, вызванных анаэ областях медицины: в гигиене и экологии для опре-      робными бациллами – возбудителями газовой ганг- деления содержания вредных примесей в воздухе,         рены. Успехи в лечении позволили снизить число воде и пищевых продуктах; в токсикологии и судеб-      осложнений, вызванных анаэробными микроорга- ной медицине для диагностики отравлений техниче-       низмами почти в 100 раз. Немалую роль в этом сыг- скими жидкостями (хлорпроизводными углеводоро-         рал тот факт, что определение карбоновых кислот дов, алкоголем и его суррогатами) и пестицидами        сделало возможным верификацию диагноза анаэ- самой различной структуры; в фармакологии и фар-       робной инфекции в течение нескольких часов, тог- мации для контроля качества препаратов, исследо-       да как традиционные бактериологические методы вания метаболизма лекарственных средств. Любой         дают ответ в лучшем случае через 4–5 суток. В каче- из этих примеров мог бы стать предметом отдельно-      стве примера на рис. 4, а дана хроматограмма гной- го разговора, но мы остановимся лишь на некото-        ных выделений легких больного, пораженного ана- рых аспектах использования газовой хроматогра-         эробной инфекцией, в которых присутствует набор фии в клиническом анализе.                             жирных кислот. Из рис. 4, б видно, как под действи-     Применение газовой хроматографии в биохими-        ем антибиотика эти кислоты исчезают, кроме уксус- ческих целях сравнительно долго не получало долж-      ной кислоты, являющейся нашим естественным ной оценки. Считалось, что биологические объекты       метаболитом. Таким образом, метод ГЖХ становит- недостаточно летучи и малоустойчивы к различным        ся методом клинического контроля. физико-химическим воздействиям, применяемым в                                                           Исследования состава липидов крови привели к газохроматографическом анализе. Успехи в разработ-                                                        пониманию проблемы атеросклероза – болезни, ве- ке методов расщепления липидов, углеводов и бел-                                                        дущей к появлению ишемической болезни сердца, ков до более простых компонентов и превращение их                                                        нарушениям мозгового кровообращения. Для прак- в летучие соединения открыли широкую дорогу для                                                        тической медицины разработаны простые и эффек- применения метода в биохимическом анализе.                                                        тивные средства диагностики нарушений метабо-     Анализ карбоновых кислот не устаревает. В иссле-   лизма липидов. В повседневной практике врачи довании липидов, в особенности жирных кислот,          ежедневно назначают исследования холестерина, газовая хроматография произвела настоящую рево-        триглицеридов, липопротеидов. При разработке люцию и до настоящего времени не имеет альтерна-       этих рутинных методик газовая хроматография тивы. Первым анализом, выполненным с помощью           использовалась как референтный метод, то есть газовой хроматографии, стало определение Джейм-        метод-эталон. Широкое внедрение во врачебную сом и Мартином карбоновых кислот. В процессе           практику исследований метаболизма липидов метаболизма микробные клетки производят низ- шие карбоновые кислоты, причем набор кислот яв- ляется как бы визитной карточкой того или иного             1   2                   1 микроорганизма. Самый авторитетный справочник по таксономии, то есть по классификации микро- организмов, “Определитель Bergey” содержит све- дения о наборе карбоновых кислот, вырабатывае-                              4 мых в процессе сбраживания различных субстратов разными микроорганизмами.     Традиционные пути идентификации микроорга-                          3 низмов – возбудителей инфекционных заболеваний или гнойно-воспалительных процессов включают в себя несколько этапов: посев биологического мате-                   а                       б риала на питательные среды, затем получение чис- тых (то есть состоящих из одинаковых микробов)            Рис. 4. Хроматограмма гноя из плевральной по-                                                           лости при анаэробном сепсисе: а – до лечения, культур, выращивание их на средах обогащения и            б – после двухнедельного лечения антибиотиком лишь затем их идентификацию по характеру разру-           цефалоспорином; 1 – уксусная кислота, 2 – про- шения тех или иных субстратов. Даже для микроор-          пионовая, 3 – масляная, 4 – изовалериановая.    бЦгЦзаз д.з. ЙДбйЗДь пкйеДнйЙкДоаь З еЦСасазЦ                                                                23        позволило разработать пути профилактики и лече-         ния. Пероксисомы, мельчайшие органеллы (части      ния атеросклероза.                                      тела клеток), обнаруженные более четверти века на-          Возможность определения индивидуального со-         зад, сейчас привлекают к себе все большее внима-      става жирных кислот тех или иных липидов являет-        ния. Метаболической функцией пероксисом являет-      ся чрезвычайно мощным инструментом в познании           ся окисление жирных кислот, некоторых гормонов и      структуры и функции биологических мембран, про-         т.д. Особенностью пероксисом является то, что они      цессов внутриклеточного метаболизма. Энергети-          ответственны за окисление тех жирных кислот, ко-      ческое обеспечение клетки осуществляется в так          торые неохотно метаболизируются иными органел-      называемом цикле трикарбоновых кислот – цик-            лами. Пероксисомы превращают эти гидрофобные      ле Кребса. Газохроматографическое определение           вещества в более гидрофильные.      спектра карбоновых кислот цикла Кребса внесло              Пероксисомные нарушения проявляются в за-      большой вклад в понимание интимных процессов            держке развития, поражении нервной и эндокрин-      внутриклеточного метаболизма при различных па-          ной систем, нарушении функции ряда внутренних      тологических состояниях.                                органов. Практически для всех пероксисомных на-          Мы и наши микробы. Углубление знаний о чело-        рушений характерно накопление в клеточных мем-      веке, понимание того, что человеческий организм         бранах и плазме крови так называемых очень длин-      является своеобразным микрокосмом, привело к            ных насыщенных жирных кислот с длиной цепи      появлению новой науки – микробной экологии че-          24–28 углеродных атомов. В настоящее время газо-      ловека. Человеческий организм представляет собой        вая хроматография – самый эффективный метод      систему сложных локальных экосистем кожи, барь-         для определения этих веществ.      ерных слизистых оболочек, кишечного содержимо-             Было бы неверно полагать, что газовая хромато-      го. Нарушение экологического равновесия в любой         графия используется только в анализе карбоновых      из этих систем приводит к весьма серьезным по-          кислот. Разработаны и применяются методы газо-      следствиям. Ярким примером является кишечный            хроматографического анализа спиртов, альдегидов,      дисбактериоз. При нарушении равновесия в систе-         аминокислот, углеводов, нуклеотидов, стероидов и      ме микробы кишечника – организм-хозяин изменя-          других соединений. Для части перечисленных выше      ется сам характер пищеварения. В норме у человека       соединений газовая хроматография стала отправ-      белки и углеводы перевариваются и всасываются в         ной точкой, позволившей разработать более прак-      тонкой кишке, которая в физиологических услови-         тичные методики. В частности, методом газовой      ях почти стерильна (от 105 до 108 микробов на 1 г со-   хроматографии определяют увеличение содержа-      держимого), а грубая растительная клетчатка попа-       ния ацетона, гептанона-2 и других кетонов при са-      дает в толстую кишку, где подвергается воздействию      харном диабете. Диагностическим показателем      ферментных систем анаэробных микроорганизмов.           цирроза печени служат ароматические кислоты, на-      Количество микробных тел в толстой кишке (1014)         копление фенилуксусной кислоты свидетельствует      на два порядка(!) превышает общее число клеток          о некоторых заболеваниях нервной системы. Для      человеческого организма. Образовавшиеся в про-          контроля состояния ожоговых больных определяют      цессе переваривания клетчатки карбоновые кисло-         производные углеводов – маннитол и лактулозу. Га-      ты выполняют важные для организма функции: пи-          зовая хроматография дает возможность количест-      тание клеток эпителия толстой кишки, угнетение          венно оценить весь клинически значимый спектр      канцерогенеза (то есть ракового перерождения) в         стероидов из одной пробы. Подобный анализ неза-      клетках кишечного эпителия, регуляцию микроб-           меним в диагностике некоторых болезней (при на-      ного биоценоза. При дисбактериозе пищеварение           рушениях функции желез внутренней секреции –      становится симбионтным – анаэробные микроор-            надпочечников, заболеваниях половой сферы). Бы-      ганизмы заселяют тонкую кишку, утилизируют пи-          ли разработаны методы определения так называе-      тательные компоненты и лишают организм пита-            мых катехоламинов – адреналина, норадреналина –      ния, повреждают нежную слизистую тонкой кишки           и родственных им соединений, гормонов щитовид-      своими мощными ферментными системами.                   ной железы, гормонов надпочечников.         Осуществить контроль дисбактериоза традици-             Окись азота – новые горизонты. Говоря о клеточ-      онными бактериологическими средствами нереаль-          ном метаболизме нельзя не упомянуть, что по су-      но. Выполнение одного детального обследования на        ществующим сегодня представлениям весь набор      дисбактериоз требует свыше года трудозатрат в че-       внутриклеточных сигналов опосредуется так назы-      ловеко-часах. Альтернатива этому исследованию –         ваемыми вторичными биорегуляторами. Их множе-      установление спектра карбоновых кислот в кишеч-         ство. Для нашей же цели наиболее интересен один –      ном содержимом методом ГЖХ как интегрального            окись азота (NO), к которой сейчас приковано      показателя микробного состояния кишечника.              внимание мировой медицинской общественности.         Пероксисомные заболевания – новая опасность.         Выяснено, что через посредство NO реализуется      Сравнительно недавно открыто семейство наслед-          механизм расширения кровеносных сосудов. Имен-      ственных заболеваний – пероксисомные заболева-          но этому обязаны жизнью тысячи пациентов,   24                                                             лйкйлйЗлдав йЕкДбйЗДнЦгъзхв ЬмкзДг, ‹11, 1996     Интенсивность                                                            Время                   Рис. 5. Метаболический профиль органических компонентов мочи здорового человека.   принимающих нитроглицерин (в биосредах нитро-               разработанных во второй половине нашего столе- глицерин трансформируется в окись азота). Пред-             тия. Применение ее в медицине носит как приклад- полагается, что наличие NO в некоторых нервных              ной, так и исследовательский характер. Основные окончаниях связано с его участием в реализации              направления – исследования нарушений метабо- механизмов восприятия боли и памяти. Окись азота            лизма липидов, в частности жирных кислот, углево- так или иначе участвует в осуществлении реакций             дов, органических кислот, аминосоединений. Тра- воспалительного каскада, механизмах гибели кле-             диционные сферы практического применения – ток. Пока единственным прямым методом опреде-               медицинская микробиология и диагностика врож- ления NO в тканях является газовая хроматография.           денных нарушений метаболизма. Перспективой    Будущее за метаболическими профилями. Техни-             применения газовой хроматографии является кон- ческий прогресс сделал возможным получение так              цепция метаболических профилей – систем интег- называемых метаболических профилей биосред:                 ральной оценки метаболизма. С унификацией ос- крови, мочи, слюны, выдыхаемого воздуха. В одном            новных техник газовой хроматографии, ростом образце анализируются несколько сот компонен-               чувствительности детекторов станет возможно по- тов. В принципе необязательно даже знание состава           вседневное использование метаболических профи- компонентов метаболического профиля. Метаболи-              лей в целях практической диагностики. ческие профили так же индивидуальны, как и отпе-                                                             ганЦкДнмкД чатки пальцев, но в отличие от папиллярных узоров хроматограмма метаболитов человеческого орга-                   1. Столяров Б.В., Савинов И.М., Витенберг А.Г. Руко- низма несет массу медицинской информации: ка-                   водство к практическим работам по газовой хромато-                                                                 графии. Л.: Химия, 1978. кие лекарства или продукты получал человек в по-                                                                 2. Вяхирев Д.А., Шушунова А.Ф. Руководство по газо- следнее время, каким микроорганизмом вызвано                    вой хроматографии. М.: Высш. шк., 1987. его заболевание и многое другое. В качестве приме-              3. Айвазов Б.В. Основы газовой хроматографии. М.: ра на рис. 5 приведен метаболический профиль мо-                Высш. шк., 1977. чи, содержащий свыше сотни достоверно иденти-                   4. Литвинов Л.Д., Руденко Б.А. Газовая хроматография фицированных компонентов.                                       в биологии и медицине. М.: Медицина, 1971.    Компьютерный анализ метаболических профи-                    5. Березкин В.Г. Хроматографический анализ окружа- лей является одним из мощнейших инструментов                    ющей среды. М.: Химия, 1979. диагностики врожденных и приобретенных нару-                    6. Яворская С.Ф. Газовая хроматография – метод опре-                                                                 деления вредных веществ в воздухе и биологических шений метаболизма, таких заболеваний, как сахар-                средах. М.: Медицина, 1972. ный диабет, подагра, алкаптонурия, разветвленно-                7. Митрука Б.М. Применение газовой хроматографии цепочечная кетонурия – “болезнь кленового сиро-                 в микробиологии и медицине. М.: Медицина, 1978. па”, фенилкетонурия и др.                                       8. Тогузов Р.Т. Хроматография в биологии и медицине.    Еще не всегда можно объяснить причины форми-                 М.: МОЛГМИ, 1985. рования того или иного метаболического профиля. Например, анализ спектра насыщенных и ненасы-                                     * * * щенных кислот и их количественных соотношений в                Кирилл Николаевич Зеленин, профессор, зав. мембране клеток крови с успехом применяется для             кафедрой химии Военно-медицинской академии, определения прогноза при сепсисе. Отсутствие удов-          доктор химических наук, член-корреспондент Рос- летворительной гипотезы, объясняющей это явле-              сийской Академии естественных наук, заслужен-                                                             ный деятель науки Российской Федерации. Автор ние, не мешает его практическому применению.                более 250 научных публикаций. Область научных    Заключение. Итак, газовая хроматография –                интересов: органическая химия азотистых соеди- один из самых мощных аналитических методов,                 нений и гетероциклов.    бЦгЦзаз д.з. ЙДбйЗДь пкйеДнйЙкДоаь З еЦСасазЦ                                                                          25        

Газохроматографический метод анализа крови Газохроматографический метод анализа крови

Источник: window.edu.ru

Читайте также
Вид:

Добавить комментарий