Общий анализ крови крс

Общий анализ крови крс

Для своевременной диагностики различных патологических состояний очень важны биохимические исследования крови. В настоящее время ветеринарные лаборатории в пробе одного животного определяют сразу несколько показателей, поэтому большое значение приобретает внедрение автоматических анализаторов.

Определение резервной щелочности и кислотной емкости. Необходимое условие нормального течения обмена веществ — это постоянство внутренней среды организма. К наиболее важным показателям, характеризующим гомеостаз, относят кислотно-основное равновесие, т. е. определенное соотношение в тканях катионов щелочей и анионов кислот, которое выражается водородным показателем pH. У плазмы крови млекопитающих животных слабощелочная реакция — 7,30…7,45.

Кислотно-основное равновесие зависит от поступления и образования в организме как кислых соединений (органические кислоты синтезируются из белков и жиров, а также появляются как продукты межуточного обмена веществ), так и щелочных, которые образуются из растительной пищи, богатой щелочными солями органических кислот и щелочноземельными солями; к продуктам метаболизма относят аммиак, амины, основные соли фосфорной кислоты и т. д.). Кислые и щелочные соединения образуются также при различных патологических процессах.

Постоянство pH обеспечивается буферными системами крови (бикарбонатной, фосфатной, гемоглобиновой и белковой), активной деятельностью почек (выводят из организма щелочные и кислые продукты обмена веществ), легких (выделяют излишки угольной кислоты), пищеварительного аппарата, кожи и молочной железы.

Обычно сдвиги кислотно-основного равновесия в организме компенсируются, поэтому изменение концентрации водородных ионов наблюдают в редких, очень тяжелых случаях. В связи с этим pH крови определяют нечасто. Состояние кислотно-основного равновесия оценивают, исследуя те регуляторные механизмы, которые обеспечивают постоянство pH: прежде всего буферные системы. О характере их изменения судят по показателям карбонатного буфера, так как его легче всего исследовать.

В клинической лабораторной практике щелочной резерв плазмы крови определяют газометрическим методом по Ван-Слайку с помощью аппарата ЩР-3 или титрометрически по И. П. Кондрахину с использованием микродиффузионного прибора (сдвоенных колб с притертыми пробками), а также прибора «Титратор Т-110».

Большое распространение в ветеринарной практике получило определение кислотной емкости крови (по Неводову) или сыворотки (по Вельтману и Климешу в модификации Н. А. Раевского), однако только при исследовании щелочного резерва плазмы можно получить точное представление о состоянии кислотно-основного равновесия (табл. 9.3).

Кислотно-основное равновесие изменяется при избытке кислот или недостатке щелочей (ацидоз), а также при избытке щелочных веществ и недостатке кислот (алкалоз). Ацидоз и алкалоз могут быть компенсированными (без сдвига pH) и некомпенсированными (со сдвигом pH), а также газовыми, дыхательными (при патологическом уменьшении или увеличении выделения легкими СО2) или негазовыми, метаболическими (избыточная выработка кислых продуктов или нарушение выведения оснований с мочой и другими биологическими жидкостями).

9.3. Показатели резервной щелочности плазмы н кислотной емкости крови у здоровых животных

Вид животного

Резервная щелочность плазмы по Ван-Слайку (об% С02)

Кислотная емкость крови по Неводову

мг/100 мл

ммоль/л

Крупный рогатый скот

40…60

460-580

116..145

Овца

45…54

460-520

115-130

Коза

48…52

380-20

95-130

Лошадь

50-65

500-600

125-150

Свинья

48-60

599-600

125-150

Собака

40…60

450-550

110-135

Курица

48-52

 

Респираторный ацидоз возникает вследствие гиповентиляции легких, приводящей к задержке С02 в организме, что наблюдают при эмфиземе и отеке легких, бронхиальной астме, бронхите, при угнетении дыхательного центра, сердечно-сосудистой недостаточности и др.

Метаболический ацидоз развивается при увеличении в крови концентрации органических кислот, что бывает обусловлено нарушением межуточного обмена в тканях, недостаточными выделением и нейтрализацией этих метаболитов пораженными почками или кишечником, а также потерей оснований. Метаболический ацидоз наблюдают при даче животным кислых или закисших кормов, обильном введении в рацион концентратов, скудном кормлении, плохой вентиляции помещений, недостатке инсоляции, отсутствии или недостатке моциона, рахите или остеодистрофии, атонии преджелудков, бронхопневмониях, лихорадочно-воспалительных процессах, сахарном диабете, кетозах, послеродовом парезе, диспепсиях молодняка, сердечно-сосудистой и дыхательной недостаточности, лучевой болезни, нефрите, эклампсии, недостаточности щитовидной железы и т. д.

Респираторный алкалоз может возникнуть при интенсивной гипервентиляции легких (повышенное выведение из организма СО2) вследствие перегрева организма, анемий, отравления угарным газом, энцефаломиелите®, опухолей мозга.

Метаболический алкалоз развивается при потере организмом кислых эквивалентов (относительное увеличение щелочных эквивалентов) или при избыточном введении щелочных солей. Наблюдают при сильной рвоте (потеря соляной кислоты), селеновом токсикозе, фибринозной пневмонии, пироплазмозе, перекорме сахаросодержащими кормами, завороте сычуга, кровопятнистом тифе.

Компенсированные формы ацидоза и алкалоза чаще протекают скрыто и достаточно долгое время, но постоянная нагрузка на компенсаторные системы может обусловить нарушения в обмене веществ не только в пределах клетки, но и всего организма (развивается декомпенсация). Например, увеличение концентрации глюкозы, кетоновых тел, аммиака, мочевой кислоты и ряда других веществ всегда приводит к нарушению кислотно-основного равновесия, но без изменения pH крови. Чтобы успешно лечить многие заболевания, необходимо знать и, если надо, корректировать кислотно-основное равновесие. Для организма предпочтительнее легкий компенсированный алкалоз, так как в этих условиях более активно протекают процессы обмена веществ. Однако чаще встречается состояние, близкое к компенсированному ацидозу.

Определение каротина и витамина А. Провитамином А является каротин, относящийся к группе пигментов каротиноидов. Каротин содержится в растительных кормах, а также в молоке, молозиве, яичном желтке, печени, рыбьем жире и т. д. Существует несколько изомеров данного соединения, из которых наибольшее значение имеет 3-каротин. Он преобладает в печени крупного рогатого скота (90…92 %).

3-каротин — насыщенный непредельный углевод с 11 двойными связями (С4оН56), который в тонком кишечнике и печени при участии фермента каротиназы присоединяет две молекулы воды и превращается в две молекулы витамина А (ретинола) — ненасыщенного высокомолекулярного спирта (С20Н29ОН).

Витамин А участвует в реакциях окисления, протекающих в клетках эпителиальных тканей, входит в состав светочувствительного зрительного пурпура (родопсина), способствует биосинтезу холестерина, ускоряет обмен фосфорных соединений, участвует в метаболизме (белков, липидов, углеводов и др.), повышает сопротивляемость организма инфекциям и инвазиям, участвует в процессах иммуногенеза, в частности в повышении фагоцитарной активности лейкоцитов и выработке антител, увеличивает количество Т-лим-фоцитов, стимулирует рост и развитие животных. Роль витамина в функции размножения связана с развитием сперматогенного эпителия, поддержанием функциональной активности клеток Серто-ли, обеспечением функций эпидимиального эпителия, клеток Лей-дига, дифференцировкой сперматогониев типа А. При недостатке ретинола снижается интенсивность сперматогенеза и нарушается созревание спермиев, которые содержат витамин А как структурный компонент акросом. Самкам витамин А необходим для нормального функционирования молочной железы, вагинального эпителия, плаценты, выработки половых гормонов, а следовательно, оплодотворения и течения беременности.

Количество каротина в сыворотке крови животных определяют по методике В. Ф. Коромыслова и JI. А. Кудрявцевой путем осаждения белков (и связанного с ними каротина) этанолом с последующей экстракцией провитамина петролейным эфиром (или бензином) и колориметрированием на КФК (колориметр фотометрический концентрационный).

Концентрацию витамина А в сыворотке крови определяют методом Бессия в модификации А. А. Анисовой на спектрофотометре с использованием ксилоло-лигроиновой или ксилоло-октано-вой смеси. Количество каротина и витаминов А и С в сыворотке крови у здоровых животных указано в таблице 9.4.

9.4. Количество каротина, витаминов А и С в сыворотке крови животных

Вид животного

Каротин

Витамин^

Витамин С

V кг/100 мл

мг/л

мкг/100 мл

мг/л

мг/100 мл

ммоль/л

Крупный рогатый

 

 

 

 

 

 

скот, периоды:

 

 

 

 

 

 

пастбищный

900…2800 9,0-28,0 40,0. .150,0

0,4 .1,5

0,6… 1,0

3,42-5,68

стойловый

400… 1000 4,0… 10.0

20,0-80,0

0,2…0,8

0,4 .0,9

2,27. .5,11

Овца

0…20

0,0…0,2

20,0-45,0

0,2-0,45

0,4 .0,8

2,27 ..4,54

Свинья

0,10

0,0-0,1

10,0-35,0

0,1-0,35

0,2…1,2

1,14…6,81

Лошадь

20… 175

0,2… 1,75

9,0-16,0

0,09-0,16 0.2…1,5

1,14…8,51

Собака

0…2

0,0…0,02

0,0… 1,0

0,0-0,01

Кролик

0,0…0,4

0,0-0,04

0,3…2,0

0,003-0,02 —

Курица

30. 300

0,3 ..3,0

15,0. .100,0 0,15…1,0

Гипокаротинемия — уменьшение количества каротина в сыворотке крови, гиповитаминоз А — снижение количества витамина А; при очень низком его содержании или отсутствии говорят об авитаминозе А.

Недостаток каротина и витамина А приводит у молодняка к задержке в росте, к снижению приростов массы тела, к поражению кожи и слизистых оболочек глаз (конъюнктивит), легких, бронхов и трахеи (бронхопневмония и бронхит), пищеварительного тракта (диспепсия), поджелудочной железы, половых желез (нарушение сперматогенеза у быков), почек, мочевыводящих путей и других органов.

Нарушение функции слезных желез и задержка отделения секрета влекут за собой сухость роговицы, ксерофтальмию, керато-конъюнктивит и кератомаляцию. Теряется способность видеть предметы в сумерках. Резко ослабляется устойчивость животных к инфекциям. Вследствие дегенеративных изменений в нервной системе и в эпителии половых органов у животных может быть бесплодие; у коров нарушаются половые циклы, наблюдают задержание последа, субинволюцию матки, стерильные аборты; снижается продуктивность; у быков-производи гелей нарушается сперматогенез. Вследствие гиповитаминоза А нередко отмечают неправильное развитие эмбрионов, у свиноматок часто встречается уродство плодов. Наиболее чувствительны к недостатку витамина А и каротина молодняк крупного рогатого скота, свиньи и птицы.

Определение витамина С. Витамин С (аскорбиновая кислота) участвует в окислительно-восстановительных процессах, свертывании крови, регенерации тканей, регулирует кроветворение и сосудистую проницаемость, активирует многие ферменты (аргиназу, протеазу, амилазу, липазу) и гормоны (кортикостероиды, гормоны щитовидной, поджелудочной и половых желез), оказывает влияние на антитоксическую и белковообразующую функцию печени, выработку антител, повышает бактерицидность крови, фагоцитарную активность лейкоцитов, благоприятно воздействует на рост и развитие молодняка. Аскорбиновая кислота обладает свойством заменять другие витамины, способствует их утилизации и рациональному использованию.

Количество аскорбиновой кислоты в сыворотке крови определяют методами титрования с индофеноловым реактивом (раствор 2,6-дихлорфенолиндофенола натриевая соль), с 2,4-динитрофенил гидрозином, метиленовой синью, нитратом серебра, йодной кислотой и др. или фотометрическим методом по А. Т. Петровой и Т. К. Абрамовой. Содержание витамина С в сыворотке крови животных показано в таблице 9.4.

При гиповитаминозе С (скорбут) развибается геморрагический диатез (кровоизлияния в коже, подкожной клетчатке, сухожилиях, мышцах, надкостнице, костном мозге, суставах, на слизистых оболочках). Скорбут проявляется главным образом у молодняка (телята, жеребята, поросята, цыплята), среди взрослых животных признаки гиповитаминоза описаны у крупного рогатого скота, свиней, собак, пушных зверей. Дефицит витамина С характеризуется снижением иммунобиологической реактивности организма и служит предрасполагающим фактором для возникновения инфекционных болезней. Наблюдают набухание и кровоточивость десен, расшатывание и выпадение зубов, образование язв на слизистой десен, щек, языка и носоглотки, желудка и двенадцатиперстного отдела тонкой кишки: развивается гипохромная анемия. У заболевших животных на коже отмечают шелушение с образованием струпьев и аллопеций: изменения в суставах проявляются изменением походки и хромотой.

Определение общего кальция. Кальций входит в состав минеральной части костей, участвует в процессе свертывания крови, повышает защитные функции организма, понижая проницаемость клеточных мембран для вредных веществ, активирует фагоцитарную активность лейкоцитов, обеспечивает нормальный уровень возбудимости нервов и мышечной ткани, уменьшает способность тканевых коллоидов связывать воду, усиливает систолическое сокращение сердечной мышцы, понижает пороз-ность и проницаемость кровеносных сосудов, повышает тонус симпатического отдела вегетативной нервной системы, участвует в различных ферментативных процессах, активируя ферменты, необходим для оплодотворения яйцеклетки.

Кальций всасывается в начальной части тонкого кишечника, выделяется главным образом толстым кишечником, а также почками и печенью; у лактирующих животных — в основном с молоком.

В сыворотке крови общий кальций находится в виде ультра-фильтрующейся (диффундируемой) и коллоидной (недиффунди-руемой) фракций. Различают также белковый (альбуминовый и глобулиновый), ионообменный и кислоторастворимый кальций. Обмен кальция в организме регулируется паратгормоном, вырабатываемым паращитовидными железами, кальцитонином, синтезируемым щитовидной железой, и витамином D (1,25 (OH)2D3).

Количество общего кальция в сыворотке крови определяют комплексометрическими методами с трилоном Б (комплексон III) и индикатором флуорексоном (по Е. П. Вичеву и JI. В. Каракашо-ву) и мурексидом (по Гольцу в модификации Сигаревой или по Луцкому). Содержание общего кальция у животных разных видов показано в таблице 9.5.

9.5. Количество общего кальция, неорганического фосфора и магния в сыворотке крови здоровых животных

Вид животного

Общий кальций

Неорганический

фосфор

Магний

мг/100 мл

ммоль/л

мг/100 мл

| ммоль/л

мг/100 мл

ммоль/л

Крупный рога

10,0..Л2,5

2,5-

.3,13

4,5-6,0

1,45.-1,94

2,0.

.3,0

0,82.

.1,32

тый скот

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Овца

9,5…13,5

2,38.

.3,38

4,5…7,5

1,45-2,48

2,0.

.3,5

0,82..

.1,44

Коза

11,0…13,0

2,75.

.3,25

6,0-8,0

1,94-2,58

 

 

 

 

Верблюд

9,1…13,3

2,28.

.3,33

5,1-7,6

1,65-2,45

 

 

 

 

Лошадь

10,0…14,0

2,5.

.3,5

4,2-5,5

1,36-1,78

2,0.

.3,0

0,82..

.1,23

Свинья

10,0…14,0

2,5.

-3,5

4,0-6,0

1,29-1,94

2,5.

•3,5

1,03..

.1,44

Собака

10,0…12,5

2,5..

.3,13

3,0…4,5

0,97…1,45

2,0.

.3,4

0,82..

.1,40

Кролик

8,5…10,5

2,12.

.2,68

2,5…3,5

0,81-1,13

2,0.

.3,8

0,82..

.1,56

Норка

7,9…14,7

1,98.

..3,68

2,3-6,3

0,74-2,03

 

 

 

 

Песец

8,4…16,0

2,1.

..4,0

2,1-4,9

0,68-1,58

 

 

 

 

Лисица

6,5…13,7

1,63.

.3,43

2,0-5,2

0,65-1,68

 

 

 

 

Курица

15,0…27,0

3,75.

.6,75

3,8-5,6

1,23-1,81

2,0.

.2,7

0,82..

.1,11

Снижение содержания общего кальция в сыворотке крови — гипокальциемию — наблюдают при рахите, остеодистрофии, голодании, уремии, нефрозах и нефритах, послеродовом парезе, бронхопневмонии, экссудативном плеврите, анемиях, лейкозах, сахарном диабете, остропротекающих тяжелых заболеваниях, диспепсиях молодняка, хроническом сепсисе, гипопаратиреозе, остром панкреатите, контагиозной плевропневмонии, хронической гематурии крупного рогатого скота, отечной болезни поросят, туберкулезе и паратуберкулезе крупного рогатого скота, фасциолезе овец, отравлении фторидом натрия, четыреххлористым углеродом, хлоридом натрия.

Гиперкальциемия — повышенное количество общего кальция в крови — встречается при остеодистрофии (III стадия), гипервита-минозе D, деформирующем артрите у быков, остеомах, гиперпа-ратиреозе, сердечной недостаточности, перитоните, гангрене, желтухе, при недостатке кальция в кормах.

Определение неорганического фосфора. Фосфор относят к числу наиболее физиологически активных элементов организма, необходимых для жизнедеятельности последнего. Фосфор в большом количестве содержится в костной ткани (до 80 % всех запасов элемента в организме), где служит вместе с кальцием пластическим материалом минеральной части костей. Фосфор также содержится в мышечной ткани (8…9 %), нервной (до 0,7 %) и в крови (до 0,2 %); входит в состав фосфатного буфера крови, участвующего в регуляции кислотно-основного равновесия организма, и в состав многих ферментов, а также соединений, активирующих ферментативные системы, которые принимают участие в углеводном, жировом и белковом обмене. Фосфор содержится в ряде веществ — переносчиков энергии (АДФ, АТФ, фосфоген и др.).

В состав общего фосфора крови включают две его фракции: неорганический фосфор (соли фосфорной кислоты) и органический. К разновидностям последнего относят фосфолипиды (фос-фатиды, липоидный фосфор), фосфор нуклеопротеидов (фосфо-протеиды), кислоторастворимый (эфиросвязанные соединения органических веществ — аденозиндифосфорная и аденозинтри-фосфорная кислоты, гексозофосфаты, триозофосфаты). Наибольшее клиническое значение имеет определение в сыворотке крови неорганического фосфора.

В клеточных элементах крови содержится только органический фосфор, а в сыворотке крови — в основном неорганический.

Фосфор всасывается в тонком кишечнике, чему способствует наличие здесь щелочной среды; при избытке кальция и магния в кишечном содержимом и недостатке витамина D в организме его всасывание ухудшается. Выводится элемент из организма главным образом с мочой и в меньшей мере с калом; в период лактации животных фосфор в основном выделяется с молоком.

Основные регуляторы обмена фосфора в организме — пара-щитовидные железы и витамин D, а также щитовидная железа и почки.

Количество неорганического фосфора в сыворотке крови можно определять по Пулсу в модификации В. Ф. Коромыслова и Л. А. Кудрявцевой с ванадат-молибденовым реактивом, по Фиске и Суббароу с эйконогеном или по Амону и Гинсбергу в модификации С. А. Ивановского с аскорбиновой кислотой. При хранении сыворотки крови органический фосфор распадается и увеличивается концентрация неорганического. Чтобы избежать ошибки при исследовании, необходимо подвергать анализу только свежую сыворотку или получать безбелковый фильтрат пробы, осадив белки раствором трихлоруксусной кислоты. Содержание неорганического фосфора в сыворотке крови у животных приведено в таблице 9.5.

В клинической практике чаще всего встречается снижение концентрации неорганического фосфора — гипофосфатемия, которую наблюдают при рахите, остеодистрофии, гиперпаратиреозе, инфекционной анемии лошадей, хронической гематурии крупного рогатого скота, атрофическом рините свиней.

Повышение уровня неорганического фосфора — гиперфосфа-темия — встречается при мышечном перенапряжении, гипопара-тиреозе, гипервитаминозе D, регенерации костей после переломов, при почечной недостаточности, связанной с нефритами, пиелонефритом, нефросклерозом, нефрозом, при жировой атрофии печени, лейкозах, отравлении натрия хлоридом.

Определение магния. Магний входит в состав минеральной части костей (около 1,5 % всех минеральных веществ костей); принимает участие в процессе мышечного сокращения; активирует включение фосфора в его органические соединения; стимулирует образование аденозинтрифосфорной кислоты из промежуточных продуктов; обеспечивает естественную резистентность организма, участвуя в образовании пропердиновой системы и стимулируя выработку антител; активирует ферментные системы, участвующие в процессах фосфорилирования и декарбоксилирования, биосинтеза белка; оказывает тормозящее влияние на центральную нервную систему; участвует в синтезе ацетилхолина. Магний необходим для нормальной деятельности рубцовой микрофлоры у жвачных.

В крови магний содержится в виде ионов (ионизированный, диффундируемый магний — около 70…85 % всего магния) и комплексных соединений с белками (белковосвязанный, недиффунди-руемый магний).

Магний всасывается главным образом в тонкой кишке, при повышенном его количестве усиливается выведение магния с мочой. Избыток магния откладывается в депо — костной ткани, а затем и в других тканях организма. Выделяется магний через толстый кишечник (50…80 %) и почки. Содержание макроэлемента регулируется гормонами щитовидной, паращитовидной желез и коры надпочечников. Концентрацию магния в сыворотке крови определяют колориметрическим методом по цветной реакции с титановым желтым или магоном. Содержание данного элемента в сыворотке крови у здоровых животных представлено в таблице 9.5.

Наибольшее клинико-диагностическое значение имеет обнаружение гипомагниемии — уменьшения концентрации магния в сыворотке крови, наблюдаемое при пастбищной тетании у жвачных (вследствие поступления в организм животного с молодой травой большого количества калия или азота), алиментарной остеодистрофии, послеродовом парезе, транспортной болезни у коров, хроническом гломерулонефрите, поносах, белково-минеральном голодании, циррозе печени, рахите, иногда при эпилепсии, злокачественных новообразованиях, остром и хроническом панкреатите.

Повышение количества магния в сыворотке крови — гипермаг-ниемию — обнаруживают при острой и хронической почечной недостаточности, гипертиреоидизме, болезнях печени, дегидратации.

Определение железа. Железо — важный компонент клетки, активно участвующий в процессах тканевого дыхания; различают железо клеточное и внеклеточное.

К соединениям железа, входящим в состав клетки, относят: 1) гемопротеины, основным структурным элементом которых является гем (гемоглобин, миоглобин, цитохромы, катал аза и пе-роксидаза); 2) железосодержащие ферменты негеминовой группы (сукцинатдегидрогеназа, ацетил-коэнзим А-дегидрогеназа, НАДНг-цитохром, С-редуктаза и др.); 3) ферменты и гемосиде-рин внутренних органов; 4) железо, рыхло связанное с белками и другими органическими веществами. Внеклеточные соединения железа включают в себя железосвязывающие белки трансферрин и лактоферрин, содержащиеся во внеклеточных жидкостях.

Наиболее значимая роль железа в организме состоит в образовании гемоглобина, выполняющего газотранспортную функцию — перенос экзогенного кислорода и эндогенных диоксида углерода и окиси углерода. Гемоглобин синтезируется преимущественно в костном мозге, причем клетки красного ростка (особенно базофильные эритробласты, полихроматофильные и меньше ортохромные эритробласты и ретикулоциты) способны очень быстро включать в себя железо.

Основной источник плазменного железа — внутренние органы (печень, селезенка, костный мозг), где разрушается гемоглобин эритроцитов. Небольшое количество железа поступает в плазму из эндогенных запасов, а также из желудочно-кишечного тракта, а именно из двенадцатиперстного отдела тонкой, начальных отделов тощей кишки, где элемент абсорбируется. Преобладающим циклом в интрамедулярном обмене железа в организме является образование и разрушение гемоглобина эритроцитов. При разрушении гемоглобина порфириновые кольца окисляются с образованием желчных пигментов, а железо освобождается, превращается в окисную форму, соединяется с железосвязывающим белком сыворотки крови (трансферрин) и транспортируется кровью в костный мозг для образования нового гемоглобина либо частично в печень и селезенку, где может откладываться в виде ферритина или гемосидерина. Таким образом, обмен железа носит в основном эндогенный характер.

Поступающее с кормом и питьем железо адсорбируется клетками эндотелия слизистой оболочки тонкого кишечника; при дефиците элемента последний всасывается также в желудке и толстом кишечнике. В слизистой оболочке кишечника ионы железа соединяются с апоферритином, окисляются и образуют ферритин, в котором железо содержится в трехвалентной форме, неспособной проходить в плазму крови. Затем при участии фермента ксантино-оксидазы образуются ионы двухвалентного железа, которые поступают в кровь, соединяются с белком трансферрином (из Р-гло-булинов) и транспортируются в костный мозг, печень и другие органы. Усвояемость железа зависит от наличия в организме меди и витамина В12.

У животных гемоглобиновое железо составляет больше половины всех запасов элемента в организме, миоглобиновое — 10… 15 %; резервное железо (в виде железобелковых комплексов ферритина и гемосидерина) в печени, селезенке, костном мозге — 20 %; железо оксидаз, цитохромных ферментов — 10…15 %; плазменное железо (негемоглобиновое, транспортное железо крови, находящееся в соединении с р-глобулином— трансферрином,— незначительное количество (не более 0,1 %). Наиболее важная часть железосодержащих веществ — гемоглобин, на образование которого влияют медь, кобальт, витамин В12, пиридоксин и другие факторы. При распаде гемоглобина образуется белок — глобин — и железосодержащий гематин. Освободившееся при этом железо превращается в окисную форму, соединяется с сывороточным белком (Р-глобулином), образуя трансферрин, который и транспортируется в костный мозг. Здесь из трансферрина железо передается ферритину ретикулярных клеток костного мозга, откуда поступает в цитоплазму эритробластов и используется для образования молекул гемоглобина. Некоторая часть освободившегося железа депонируется в печени и селезенке в виде ферритина и гемосидерина. Из организма железо выводится в основном с калом, но также и с мочой, а у лактирующих животных — с молоком.

Содержание железа определяют в сыворотке крови батофенан-тролиновым методом. Нормальные значения показателя указаны в таблице 9.6.

9.6. Содержание железа, меди и кобальта в сыворотке крови (или в крови)

животных

Вид

Железо в сыворотке

Медь в крови

Кобальт в крови

животного

мкг/100 мл

мкмоль/л

мкг/100 мл

мкмоль/л

мкг/100 мл

нмоль/л

Крупный

рогатый

скот

90…НО

16,1…19,7

75…95

11,8…14,9

3…5

509…841

Овца

110…130

19,7…23,3

50…70

7,9…11,0

1,5…4

254…679

Свинья

160…200

28,6…35,8

200…240

31,4…37,7

2,5…5

424…848

Лошадь

110…130

19,7…23,3

1…5

170…848

Собака

100… 120

17,9…21,5

75…95

11,8.„14,9

1,5…2,5

254…424

Кролик

100…140

17,9…25,0

90…110

14,2…17,3

2…3

339…509

Курица

160…200

28,6…35,8

50…70

7,9…11,0

2…3

339…509

Примечание. Коэффициент для пересчета мкг/100 мл в мкмоль/л или нмоль/л: для железа —0,179, для меди —0,157, для кобальта — 169,69.

Повышенное содержание железа в сыворотке крови — гиперси-деремия — может быть установлено при большом поступлении железа в организм, апластической и гемолитической анемии, жировой дистрофии печени, циррозе печени и хроническом гепатите (недостаточное использование железа), гемолитической и паренхиматозной желтухах, при бронхопневмонии и т. д.

Уменьшение содержания железа в сыворотке крови — гипосиде-ремию — наблюдают при недостаточном поступлении железа с кормами, повышенной потребности организма в нем (при острых и хронических кровопотерях, беременности), острых инфекционных болезнях, анемиях, связанных с воспалениями, интоксикациями (при гнойных и септических заболеваниях), при уремии, сердечной недостаточности, бронхите и бронхиальной астме.

Определение меди. Одна из основных функций меди в организме животных и человека — ее участие в процессах кроветворения. Медь катализирует включение железа в структуру гема и способствует созреванию эритроцитов на ранних стадиях развития, повышает кислородсвязывающую способность крови; участвует в некоторых иммунологических процессах, положительно влияет на деятельность нервной и сердечно-сосудистой систем, процессы роста и размножения животных, на углеводный обмен, ускоряет процессы окисления глюкозы, задерживает распад гликогена и способствует его накоплению в печени.

Медь всасывается главным образом в желудке и начальном отделе тонкого кишечника, где слизистая оболочка содержит метал-лотионеин, формирующий комплексное соединение с медью. Синтез металлотионеина регулируется содержанием цинка и меди в печени на уровне транскрипции мРНК. Пройдя через эпителий слизистой оболочки желудка и тонкой кишки, медь связывается с транскупреином и альбумином и в меньшей степени с аминокислотами, преимущественно гистидином. В крови также обнаружен глицилгистидиллизин, ассоциированный с альбуминовой и а-глобулиновой фракциями, который образует тройной комплекс с медью и альбумином, обеспечивая поступление этого элемента внутрь клеток в нетоксичной и доступной для них форме. Медь, первоначально связанная металлотионеином, в дальнейшем включается в церулоплазмин, другие медьсодержащие ферменты и компоненты желчи. Церуллоплазмин синтезируется на рибосомах клеток печени. В последней медь также депонируется в составе металлотионеина и превращается в труднодиализируемую форму, выделяемую в составе желчи. Медь почти не подвергается обратному всасыванию. В основном она выводится из организма с калом, в незначительных количествах с мочой, частично с молоком и слюной.

В плазме крови большая часть меди (90 %) связана с белками в виде церулоплазмина (соединение меди с а2-глобулином), и лишь незначительное количество ее содержится в свободном coстоянии (в ионной форме); в эритроцитах обнаружен комплекс меди с белками — гемокупреин. Церулоплазмин обеспечивает эритроцитам значительную устойчивость к гемолизу, а также ускоряет накопление железа в печени и влияет на пролиферацию молодых клеток эритро- и гранулопоэтической систем, что в конечном счете и вызывает активизацию эритропоэза в костном мозге.

Количество меди в крови определяют спектрофотометрически или на атомно-абсорбционном спектрофотометре, а также с ди-этилдитиокарбаматом натрия. Содержание меди в крови животных разных видов приведено в таблице 9.6.

Увеличение количества меди в крови — гиперкупремия — может быть в острый период инфекций, протекающих с лихорадкой и распадом клеточных элементов, при заболеваниях печени (гепатит, цирроз и механическая желтуха), при лейкозах, мегалоплас-тической и апластической анемиях, злокачественных новообразованиях, гипотиреозе. Отравление солями меди сопровождается некрозом клеток печени, метгемоглобинемией, гиперкупремией, билирубинемией, гемолизом эритроцитов.

Уменьшение содержания меди в крови — гипокупремия — встречается при некоторых анемиях у молодняка с нарушением их роста и развития. Наблюдают также диарею, депигментацию шерстного покрова, нарушение костеобразования, извращенный аппетит, нефротический синдром, снижение продуктивности. При недостатке меди в рационе у крупного рогатого скота развивается лизуха, у овец — энзоотическая атаксия.

Определение кобальта. Кобальт присутствует в молекуле витамина В]2, который синтезируется у жвачных в рубце, а у других животных — в толстом кишечнике (этот витамин стимулирует кроветворение). В крови элемент находится в белковосвязанной форме и в небольшом количестве как структурный компонент витамина В12 (4 %). Кобальт влияет на отложение фосфора в костях, стимулируя активность щелочной фосфатазы; принимает участие в белковом обмене, активируя фермент аргиназу; усиливает тканевое дыхание; стимулирует распад углеводов и активирует фосфо-глюколипазу и многие другие ферменты (рибофлавинкиназу, ма-латдегидрогеназу, пируватдекарбоксилазу и др.); усиливает синтез нуклеиновых кислот и мышечных белков; повышает ассимиляцию азота и основной обмен; необходим для синтеза тиреоидных гормонов. Значение кобальта в кроветворении связывают не только с кобальтсодержащим витамином В12, но и с образованием под его влиянием эритропоэтина.

Поступающий в организм с кормом кобальт всасывается в тонком кишечнике, причем поступление его в организм повышается при дефиците железа. Депонируется кобальт в печени, почках и в меньшей степени — в щитовидной железе, надпочечниках, селезенке и других органах. Выводится из организма как через желудочно-кишечный тракт с желчью, так и через почки с мочой.

Количество кобальта в крови определяют или спектрофотометрически, или на атомно-абсорбционном спектрофотометре. Нормальные значения показателя приведены в таблице 9.6.

Снижение концентрации кобальта в крови — гипокобалыпоз — наблюдают при недостаточном поступлении в организм животных этого элемента с кормами, в этом случае развивается кустарниковая болезнь, береговая, или изнуряющая, болезнь, энзоотический маразм, солевая болезнь, сухотка (pening).

Определение селена. Селен обладает антиоксидантным и антиканцерогенным действием, принимает участие в окислительном фосфорилировании, влияет на метаболизм серы, состояние иммунобиологической активности организма, играет определенную роль в механизме зрения и воспроизводства. Селен всасывается в тонком кишечнике. В транспорте и депонировании элемента участвует белок селенопротеин Р.

Количество селена в крови определяют колориметрическим методом с диаминобензидином по В. В. Ковальскому и А. Д. Гололобову, а также спектрофотометрически.

У крупного рогатого скота в крови содержится 8…11 мкг/100 мл селена (или 1,0…1,4 мкмоль/л; для пересчета количества селена в единицы СИ мкг/100 мл умножают на коэффициент 0,127), а у овец — 8…12 мкг/100 мл (или 1,0…1,5 мкмоль/л).

При недостатке селена и витамина Е в рационе развивается беломышечная болезнь у телят и ягнят, токсическая дистрофия печени у свиней, дистрофия поджелудочной железы, энцефаломаля-ция и экссудативный диатез у цыплят. Избыточное поступление селена с кормами неблагоприятно отражается на процессах осси-фикации, вызывает алкалоз (щелочную болезнь), пороки развития эмбрионов у кур, свиней, овец и кошек, а также «вертячку» у крупного рогатого скота и овец.

Определение связанного с белками йода. Йод — один из важных микроэлементов организма, входит в состав гормонов щитовидной железы (трийодтиронин, тироксин), которые регулируют все основные виды обмена веществ. Хронические поражения щитовидной железы вызывают многие патологические процессы в различных органах и системах организма.

Йод всасывается в передних частях тонкого кишечника. В организме элемент накапливается в щитовидной железе, почках и слюнных железах. В мышцах его концентрация в 1000 раз меньше, чем в щитовидной железе. Выделяется йод преимущественно через почки (70…80%), в меньшей степени — через слюнные и потовые железы, у лактирующих животных — с молоком.

Белковосвязанный йод в сыворотке крови определяют спектрофотометрически. Его содержание в норме у крупного рогатого скота составляет 4…5 мкг/100 мл (или 315…394 нмоль/л); для перечисления в единицы СИ мкг/100 мл умножают на коэффициент 78,795), а у овец — 4…8 мкг/100 мл (или 315…630 нмоль/л).

При недостаточном поступлении йода с кормами и водой у животных развивается эндемический зоб, у коров снижается плодовитость, овцы резко отстают в росте, у супоросных свиноматок увеличивается число мертворожденных поросят, молодняк отстает в росте, у птиц снижается яйценоскость. При избыточном поступлении йода с кормами у животных снижаются среднесуточные приросты массы, развиваются анемия, цирроз печени, нефроз, увеличивается щитовидная железа (гипотиреоз).

Определение общего белка и белковых фракций. В крови циркулирует большое количество разных белков. Из всех веществ сухого остатка крови (9…10%) большая часть приходится на белок (6,5…8,5 %), который представлен альбуминами и глобулинами (в плазме крови содержится также фибриноген). Альбумины (как и фибриноген) и большая часть глобулинов (в основном а- и (3-глобулины) и некоторое количество у-глобулинов синтезируются в печени (у-глобулины образуются главным образом плазматическими и лимфоцитарными клетками).

Физиологическое значение белков сыворотки (плазмы) крови велико. В частности, они поддерживают ее вязкость, коллоидноосмотическое давление, тем самым сохраняя объем крови, принимают активное участие в свертывании последней (наличие фибриногена, протромбина, проакцелерина, проконвертина, антигемо-фильного глобулина и других факторов); соединяясь с рядом веществ, обеспечивают их транспорт к тканям (альбумины переносят витамины С, К, Р, антибиотики, различные промежуточные продукты обмена; глобулины транспортируют жирные кислоты, соли желчных кислот, желчные пигменты, гематин, различные лекарственные препараты, каротин, витамины A, D, Е, К, В^, железо, медь, гемоглобин и т. д.). Белки участвуют в поддержании постоянства pH крови (белковая буферная система), в иммунных процессах организма (многие глобулины являются носителями иммунных тел — иммуноглобулины), стабилизации уровня катионов крови (образование недиализируемых соединений с кальцием, железом, магнием, медью и т. д.).

Количество общего белка в сыворотке крови определяют чаще всего с помощью рефрактометров или более точным биуретовым методом. Чтобы исследовать белковые фракции сыворотки и плазмы крови, прибегают к электрофоретическому разделению сыворотки на бумаге, что позволяет определить у животных 4…5 фракций: альбумины, а- (иногда и а2), р- и у-глобулины. С помощью электрофореза в агаровом, крахмальном или полиакриламидном геле можно выявить значительно большее число белковых фракций. Наибольшее их число удается определить с помощью иммуноэлектрофореза.

Количество общего белка и соотношение между белковыми фракциями в сыворотке крови у разных видов животных приведены в таблице 9.7.

9.7. Количество общего белка и белковых фракций в сыворотке крови

 

Общий белок

Белковые фракции, %

 

Вид животного

г/100 мл

г/л

альбумины

 

глобулины

 

 

а

р

Y

Крупный рогатый скот

7,2…8,6

72—86

30…50

12…20

10…16

25-40

Овца

6,0…7,5

60…75

35-50

13-20

7…11

20-46

Свинья

6,5-8,5

65—85

40…55

14…20

16-21

17…25

Лошадь

6,5-7,8

65…78

35…45

14…18

20-26

18…24

Собака

5,9-7,6

59-76

48…57

10…16

20…25

10-14

Кролик

6,0…8,2

60…82

55..65

8…12

7…13

17…23

Курица

4,3…5,9

43…59

31-35

17…19

11…13

35-37

Снижение содержания общего белка в сыворотке крови — ги-попротеинемия — развивается главным образом за счет уменьшения количества альбуминов, что наблюдают при длительном недокорме животных; низком содержании белка в рационе, не сбалансированном по аминокислотному составу; плохом усвоении протеина корма вследствие хронического нарушения деятельности желудочно-кишечного аппарата или недостатка углеводов, макро- и микроэлементов, ряда витаминов (А, Е и др.); при алиментарной остеодистрофии, нефрозе и нефрите (вследствие протеинурии); хроническом паренхиматозном гепатите и циррозе печени (в результате снижения синтеза белков); острых и хронических кровотечениях, гидремии, абсцессах, злокачественных новообразованиях, паратуберкулезе (у клинически больных животных), туберкулезе (терминальная стадия), затяжном сепсисе, тейлериозе (с тяжелым течением), лихорадочных состояниях и интоксикациях и т. д.

Гиперпротеинемия — увеличение содержания общего белка в крови, обычно связано с повышением количества глобулинов и встречается при белковом перекорме животных (высококонцентратном типе кормления), избытке переваримого протеина и недостатке легкоусвояемых углеводов, дефиците каротина, неправильном соотношении кальция и фосфора и недостатке витамина D, при остром гепатите, дистрофии печени (за счет повышения содержания глобулинов и снижения количества альбуминов), тяжелых формах диареи, дегидратации организма, диабете, острых воспалительных процессах, флегмонах, сепсисе, тяжелых инфекциях и других заболеваниях.

Соотношение белковых фракций может изменяться независимо от содержания общего белка и поэтому для врача это более информативный показатель. Уменьшение концентрации альбуминов в сыворотке крови — гипоалъбуминемию — наблюдают при диффузном циррозе печени, голодании, кахексии, инфекционных болезнях, воспалительных процессах, острых пневмониях и бронхопневмониях, осложнении пневмонии гангреной, клинической форме туберкулеза, в предклинический и особенно клинический период паратуберкулеза, при болезни Ауески, лейкозе, кетозах, диспепсии телят, А-гиповитаминозе, миоглобинурии лошадей, желточном перитоните кур, тейлериозе, липоидном и амилоидном нефрозах, нефрите, нефросклерозе, токсикозе беременности, токсических повреждениях печени, опухолях с метастатическими новообразованиями, гемолитических процессах и т. д.

Увеличение процента альбуминов — гиперальбуминемия — встречается при дегидратации.

Концентрация а]-глобулинов увеличивается на начальных стадиях пневмонии, при острых полиартритах, экссудативном туберкулезе легких, острых инфекционных болезнях, сепсисе, злокачественных новообразованиях.

Количество а2-глобулинов увеличивается на начальной и поздней стадиях пневмоний, при острых полиартритах, экссудативном и хроническом туберкулезе легких, острых инфекционных болезнях, сепсисе, хроническом эндокардите, холецистите, цистите и пиелите, амилоидном и ликоидном нефрозах, нефритах, нефросклерозе, токсикозах беременности, кахексиях, опухолях с метастазами, обтурационной желтухе.

Содержание р-глобулинов увеличивается при нефрозе, нефрите, нефросклерозе, токсикозах беременности, кахексии, злокачественных новообразованиях, полиартрите, некоторых формах лейкозов, обтурационной желтухе, железодефицитной анемии, нарушениях липидного обмена.

Уменьшение количества у-глобулинов — гипогамма-глобулине-мию — отмечают при длительных хронических инфекциях, нефрозе (липоидном и амилоидном), нефрите, нефросклерозе, токсикозах беременности, на терминальной стадии туберкулеза, кахексии.

Увеличение содержания у-глобулинов — гипергамма-глобулине -мия — встречается на поздних стадиях пневмоний, при полиартрите, экссудативном туберкулезе легких, острых инфекционных болезнях, сепсисе, хроническом туберкулезе легких, хроническом эндокардите, холецистите, уроцистите и пиелите, злокачественных новообразованиях, гепатите, гемолитических процессах, дерматозах, лейкозах, циррозе печени, обтурационной желтухе.

Появление в плазме крови структурно-аномальных, функциональ-но-инертных патологических белков называется парапротеинемией. Ее наблюдают при тяжело протекающих хронических заболеваниях паразитарной, инфекционной или онкологической этиологии.

Определение глюкозы. Углеводы служат основным источником энергии. Они представлены в различных структурных комплексах организма. Например, мукополисахариды входят в состав слизей, желудочного сока, слюны, семенной плазмы, в комплексе с коллагеном или липидами присутствуют в хрящах, костной ткани. Основной источник энергии в организме — глюкоза (виноградный сахар), количество ее в крови отражает состояние углеводного обмена в организме.

Полисахариды кормов в кишечнике расщепляются до моносахаридов — глюкозы, фруктозы и галактозы. Два последних соединения в стенке кишечника под влиянием кишечной фосфатазы фосфорилируются и превращаются в глюкозу, которая всасывается в кровь и поступает к клеткам. Избыток ее откладывается в печени (в виде гликогена), мышцах и других тканях.

У жвачных животных большая часть углеводов в преджелудках ферментируется до летучих жирных кислот, так что в нижележащие отделы пищеварительного тракта поступает небольшое количество углеводов. Образовавшаяся в кишечнике глюкоза всасывается в тонком кишечнике и в незначительном количестве — в толстом. В рубце всасываются летучие жирные кислоты и ограниченное количество глюкозы. Организм этих животных пополняется глюкозой в результате глюконеогенеза из указанных кислот в печени и частично в стенке пищеварительного тракта. Наиболее выраженным глюкогенным действием обладает пропионовая кислота.

В регуляции уровня глюкозы крови (гликемия) принимают участие поджелудочная железа (инсулин, глюкагон), гипоталамус, гипофиз (АКТГ), надпочечники (глюкокортикостероиды, адреналин, норадреналин), щитовидная железа (тиреоидные гормоны), симпатический отдел вегетативной нервной системы.

Нередко в клинической практике определяют содержание сиа-ловых кислот (комплексные соединения белков и углеводов — гликопротеиды), молочной и пировиноградной кислот (конечные продукты превращения глюкозы).

Количество глюкозы в крови (нормальные показатели у животных разных видов приведены в таблице 9.8) определяют ортотолу-идиновым методом, способом Сомоджи или ферментативным глюкозооксидазным методом по В. К. Городецкому.

9.8. Количество глюкозы в крови здоровых животных разных видов

Вид животного

Глюкоза

Вид

Глюкоза

мг/100 мл | ммоль/л

животного

мг/100 мл | ммоль/л

Крупный рогатый скот

Овца

Свинья

40…60    2,22…3,33

35…60    1,94…3,33

45…75    2,50…4,16

Лошадь

Собака

Кролик

Курица

55…95    3,05…5,27

60…80    3,33…4,44

75…95    4,16…5,27

80…    140 4,44…7,77

Примечание. Коэффициент для пересчета количества глюкозы из мг/100 мл в ммоль/л равен 0,0555.

Снижение уровня глюкозы в крови — гипогликемию — наблюдают при кетозах, диспепсии молодняка, голодании, тейлериозе, А-гиповитаминозе, лейкозе, гипофункции надпочечников и щитовидной железы, остром поражении печени.

Повышение концентрации глюкозы в крови — гипергликемия — встречается при сахарном диабете, поедании большого количества сахаров с кормами, стрессовых состояниях, приступах болей, гиперфункции надпочечников, тиреотоксикозе, гиповитаминозах В! и С, почечной недостаточности, нефрите, циррозе печени, миоглобинурии лошадей, при болезни Ауески, атониях преджелудков, острых воспалениях.

Определение кетоновых тел. Кетоновые тела — (3-оксимасляная (3-оксибутират), ацетоуксусная кислота (ацетоацетат), ацетон — образуются главным образом в печени и в меньшей степени в почках, а у жвачных животных, кроме того, в стенке преджелудков и в молочной железе в результате окисления жирных кислот, а также в процессе обмена углеводов и некоторых аминокислот. При нормальном обмене веществ в организме ацетоуксусная кислота распадается на диоксид углерода и воду (при включении в цикл три-карбоновых кислот); Р-оксимасляная кислота, окисляясь, превращается в высшие жирные кислоты, которые идут на синтез нейтральных жиров и других липидов.

Количество кетоновых тел в крови определяют йодометрическим методом по Энгфельду в модификации С. М. Лейтеса и А. И. Одиновой или микродиффузионным методом по Р. Я. Трубке. Приблизительное содержание кетоновых тел в сыворотке крови можно установить с помощью реактива Лестраде.

В норме у крупного рогатого скота в крови содержится р-ок-симасляной кислоты 0,8…4,6 мг/100 мл (0,14…0,79 ммоль/л), ацетона вместе с ацетоуксусной кислотой — 0,2… 1,4 мг/100 мл 0,03…0,24 ммоль/л), всего 1,0…6,0 мг/100 мл (0,17…1,03 ммоль/л) кетоновых тел. У овец в крови содержание кетоновых тел составляет 3,0…7,0 мг/100 мл (0,52…1,2 ммоль/л), у свиней — 0,5…2,5 мг/100 мл (0,09…4,3 ммоль/л). Для перечисления количества кетоновых тел в ммоль/л следует содержание их в мг/100 мл умножить на коэффициент 0,1722.

Увеличение количества кетоновых тел в крови — кетонемию (гиперкетонемию) — наблюдают при кетозах — первичных (кетоз молочных коров, алиментарная кетонурия суягных овец) и вторичных (при атонии и переполнении рубца, послеродовом парезе, эндометрите), а также при сахарном диабете, гипокобальтозе, голодании.

Определение билирубина. Билирубин — один из конечных продуктов пигментного обмена (гемохромогенных пигментов), экск-ретируемых из организма печенью вместе с желчью. Большая его часть образуется в печени и селезенке при распаде гемоглобина, миоглобина, цитохромов. Эритроциты (продолжительность их жизни 110…130 дней) разрушаются в купферовых клетках печени, гистиоцитах соединительной ткани костного мозга, в селезенке и других органах. Освободившийся при этом гемоглобин подвергается изменениям (разрыв одного метинового мостика, окисление двухвалентного железа в трехвалентное) с образованием вердогло-бина. В дальнейшем от вердоглобина отщепляются железо и белок глобин, в результате чего образуется биливердин, который ферментативным путем восстанавливается до непрямого, несвязанного, свободного, непроведенного билирубина (гемибилирубин). Последний нерастворим в воде и поэтому не выводится с мочой, он является нормальной составной частью сыворотки крови. При поступлении в клетки печени непрямой билирубин под влиянием фермента глюкуронилтрансферазы связывается с глюкуроновой кислотой, образуя прямой, связанный, проведенный билирубин (холебилирубин), состоящий из пигментов: билирубинмоноглюко-ронида (20…25 %) и билирубиндиглюкоронида (75…80 %), которые растворимы в воде и выделяются с желчью в тонкий кишечник.

В желчных путях и желчном пузыре от части прямого билирубина (10 %) отщепляется глюкуроновая кислота, а затем происходят восстановительные процессы с последовательным образованием мезобилирубина и мезобилиногена (уробилиногена). Остальной билирубин трансформируется в тонком кишечнике. Часть мезобилиногена (уробилиногена) всасывается в тонком кишечнике и по воротной вене попадает в печень, где полностью расщепляется до дипирролов. При повреждении паренхимы печени процесс расщепления нарушается, уробилиноген переходит в кровь, а затем в мочу. Основная часть мезобилиногена в толстом кишечнике под влиянием анаэробной микрофлоры восстанавливается до стеркобилиногена, который в прямом отделе толстой кишки в основном окисляется до стеркобилина и удаляется с калом. Небольшое количество стеркобилиногена всасывается в кровь (по геморроидальным венам) и затем выводится почками с мочой. Следовательно, у здоровых животных в свежей моче содержится стеркобилиноген, а не уробилиноген.

Количество билирубина и его фракций в сыворотке крови определяют фотоэлектроколориметрическим методом Йендрашика, Клеггорна и Грофа (с использованием кофеинового реактива и построением калибровочного графика по стандартным растворам билирубина) или спектрофотометрическим методом Эберлайна. Концентрация билирубина в сыворотке крови здоровых животных указана в таблице 9.9.

9.9. Количество билирубина в сыворотке крови животных

Вид животного

Общий билирубин

Прямой билирубин

Автор

мг/100 мл

мкмоль/л

мг/100 мл

мкмоль/л

Крупный рогатый скот

(телята в возрасте

до 15 дней)

Лошадь

Свинья

Овца

Собака

Курица

0,11…0,48

0,16…1,86

0,62…1,42 0,0…0,4 0,0…0,39 0,12…0,14 0,1…0,35

1,88…8,21

2.74…31.81

10.6…24.29 0,0…6,84 0,0…6,67 2,05-2,39 1,71-5,99

0,0-0,72 0,0-14,31 0,04-0,58 0,68-9,92 0,0-0,27 0,0-4,62

Н. А. Савкин

»

»

В. Келли Л. Шлезинге

»

Примечание. Коэффициент для пересчета количества билирубина из мг/100мл в мкмоль/л равен 17,104.

Увеличение содержания в сыворотке крови билирубина — би-лирубинемия (гипербилирубинемия) — может быть следствием повышенной концентрации непрямого или прямого билирубина или одновременно обоих соединений.

Концентрация свободного билирубина увеличивается при интенсивном разрушении (гемолизе) эритроцитов и освобождении большого количества гемоглобина, когда печень оказывается неспособной переработать в прямой билирубин большое количество непрямого билирубина, что встречается при пироплазмидо-зах, инфекционных болезнях (кровопятнистый тиф, инфлюэнца и др.), отравлениях гемолитическими ядами (куколь, соляник, мышьяк и лр.), переливании несовместимой крови.

Содержание прямого билирубина в сыворотке крови значительно повышается при механической (обтурационной) желтухе, когда вследствие нарушенного желчевыделения скапливается желчь и увеличивается давление в желчных путях, что обусловливает переход желчи в кровяное русло. Механическая желтуха развивается при закупорке желчных путей желчными камнями, паразитами, сдавливанием их новообразованиями, увеличенными лимфатическими узлами, абсцессами, а также вследствие их сужения при сморщивании рубцовой ткани и воспалении желчных протоков и слизистой оболочки двенадцатиперстного отдела тонкой кишки. При механической желтухе несколько увеличивается содержание непрямого билирубина.

При паренхиматозной желтухе вследствие деструкции печеночных клеток прямой билирубин попадает в кровь и его содержание в ней значительно возрастает. При поражении гепатоцитов также нарушается процесс перевода непрямого билирубина в прямой, что обусловливает повышение уровня последнего в крови. Таким образом, при паренхиматозной желтухе увеличивается концентрация в крови непрямого и прямого билирубина. Паренхиматозная желтуха может развиваться при некоторых инфекционных болезнях (инфекционная анемия, контагиозная плевропневмония, мыт, инфекционный энцефаломиелит, лептоспироз и др.), остром и хроническом гепатитах, токсической дистрофии печени и т. д.

Определение активности ферментов. Ферменты (энзимы) — специфические белки, которые в организме выполняют роль биологических катализаторов, т. е. участвуют во всех биохимических реакциях. В каждой из них задействован определенный фермент. Многие из ферментов представлены в нескольких молекулярных формах — изоферментах (изоэнзимах). В настоящее время известно до 2000 ферментов, всех их по типу катализируемой реакции разделяют на оксидоредуктазы, трансферазы, гидро-лазы, лиазы, изомеразы, лигазы (синтетазы). Однако диагностическое значение имеют лишь несколько десятков из них.

Большая часть ферментов находится внутри клеток и появляется в сыворотке крови в большом количестве лишь при их повреждении и разрушении. Изменения в специфических ферментативных реакциях можно идентифицировать как причину или следствие различных патологических состояний. Известны избирательные изменения ферментативной активности при ряде заболеваний у животных, что создает возможность для использования ферментативных тестов для диагностических и прогностических целей. Некоторые ферменты находятся в каком-либо органе в значительно большем количестве, чем в других, т. е. обладают высокой органной специфичностью. Изменение активности таких ферментов в крови однозначно свидетельствует о поражении конкретного органа. В ветеринарной практике с диагностической целью в комплексе с другими методами исследования можно определять в сыворотке крови активность следующих ферментов.

Активность лактатдегидрогеназы (ЛДГ) значительно повышается при инфаркте миокарде (ЛДГЬ в меньшей степени ЛДГ2), при этом чем обширнее поражение, тем дольше сохраняются изменения в изоферментном спектре ЛДГ. При заболеваниях печени (гепатиты, цирроз, токсическое воздействие, метастазы) увеличивается активность фракций ЛДГ4 и ЛДГ5. При мышечной дистрофии (беломышечная болезнь молодняка, миоглобинурия лошадей) активность ЛДГ4 и ЛДГ5 заметно снижается, а ЛДГ], ЛДГ2 и ЛДГ3 повышается. При легочной патологии (острая очаговая и крупозная пневмония, хроническая пневмония) в сыворотке крови возрастает активность ЛДГ3. При остром лейкозе обычно обнаруживают отчетливое увеличение активности ЛДГ2 и ЛДГ3.

Активность аспартатаминотрансферазы (АсАТ) наиболее резко повышается при инфаркте сердечной мышцы. При заболеваниях печени (гепатит, токсикозы, нарушение оттока желчи, метастазы) в первую очередь и наиболее значительно по сравнению с АсАТ изменяется активность аланинаминотрансферазы (АлАТ).

Активность щелочной фосфатазы (ЩФ) в сыворотке крови резко увеличивается при механической желтухе, циррозе печени, остеодистрофии, рахите молодняка, деформирующем остите, злокачественных новообразованиях костей; снижается — при гипофос-фатемии, выраженной анемии, гипотиреозе.

При острых и подострых заболеваниях печени с поражением ее паренхимы наиболее четким изменением служит также повышение активности в сыворотке крови сорбитдегидрогеназы и орнитинкарбомоилтрансферазы, изоцитратдегидрогеназы и аргиназы. Хронические поражения печени (цирроз), а также острые и хронические отравления инсектицидами сопровождаются снижением ферментативной активности сывороточной холинэ-стеразы.

При кровепаразитарных заболеваниях (бабезиоз, анаплазмоз) у крупного рогатого скота, лошадей, собак возрастает активность АсАТ, а при тейлериозе и франсаиелезе крупного рогатого скота — альдолазы, АсАТ и АлАТ (аланинаминотрансферазы).

При лейкозах крупного рогатого скота и опухолях в сыворотке крови увеличивается активность ЛДГ и изменяется ее изофермент-ный спектр (повышается активность четвертой фракции), появляется активность гексокиназы, возрастает активность рибонуклеаз и дезоксирибонуклеаз.

Заболевания поджелудочной железы сопровождаются гипер-ферментемией таких энзимов, как амилаза, липаза, рибонуклеаза, дезоксирибонуклеаза, (3-глюкуронидаза. В частности, при чуме свиней развивается острый панкреатит с резким увеличением активности амилазы в плазме крови.

Определение гемоглобина и его разновидностей. Гемоглобин — основной компонент эритроцитов, по химической природе относящийся к сложным белкам — хромопротеидам. Переносит кислород и диоксид углерода, входит в состав гемоглобиновой буферной системы крови, участвующей в регуляции кислотно-основного равновесия.

Гемоглобин состоит из белкового компонента (глобин) и про-стетической группы (гем), содержащей железо в виде двухвалентной закисной формы. Молекула гемоглобина содержит четыре гема и один глобин. Гем — это комплекс железа с протопорфири-ном, который включает в себя четыре пиррольных кольца, соединенных в кольцо через метановые мостики СН. Глобин — тетрамер, состоит из двух пар полипептидных цепей, входит в группу гистонов — серосодержащих белков типа альбуминов. Отличие гемоглобина у разных видов животных связано не с гемом, а с особенностями белкового компонента.

Гемоглобин синтезируется путем синхронной продукции гема и глобиновых цепей в красном костном мозге, его биосинтез начинается на самых ранних стадиях эритропоэза, в период перехода базофильных нормоцитов (нормобластов) в полихроматофиль-ные.

Разрушается гемоглобин через 110… 130 дней жизни эритроцитов в клетках системы фагоцитирующих мононуклеаров.

Кислород переносится в составе оксигемоглобина, т. е. в виде соединения с гемоглобином. Молекула последнего содержит четыре гема, поэтому она может связать четыре молекулы кислорода. Соединение гемоглобина с кислородом непрочно и легко распадается при снижении парциального давления кислорода в капиллярах тканей. Гемоглобин также переносит из тканей к легким около 20 % всего диоксида углерода крови (большая часть С02 транспортируется в цитоплазме эритроцитов в виде гидрокарбоната калия), причем считают, что в гемоглобине кислород связывается железом гема, а диоксид углерода — глобином.

Известно, что гемоглобин в действительности состоит из смеси близких по структуре и свойствам молекул (обладает гетерогенностью) и может быть разделен на фракции. Причина гетерогенности гемоглобина — разнообразие клеточных форм, гетерогенность популяции эритроцитов, связанная с изменением типа кроветворения (мегалобластический, нормобластический) и его локализацией, интенсивности эритропоэза, присутствием в крови клеток разного возраста, размеров и формы. Биохимические исследования гемоглобина дополняют сведения об изменениях эритропоэза, так как в неоднородной популяции эритроцитов трудно выделить изменения каких-либо небольших групп. Различают несколько физиологических и патологических разновидностей гемоглобина. К физиологическим относят гемоглобин взрослых животных — НЬА и фетальный гемоглобин — HbF, который составляет у плода основную массу этого пигмента, а к 50…70-му дню жизни теленка исчезает почти полностью. Патологические разновидности гемоглобина (В, С, D, Е, G, Н) возникают вследствие врожденного нарушения синтеза гемоглобина (гемоглобинопатии, гемоглобинозы), при которых могут развиваться тяжелые гемолитические анемии. Патологические разновидности гемоглобина исследуют с помощью электрофореза, хроматографии, щелочной денатурации и другими методами.

В организме гемоглобин может вступать в соединение не только с кислородом (оксигемоглобин) и диоксидом углерода, но и с другими газами и веществами. Например, при соединении с угарным газом СО образуется карбоксигемоглобин, с нитритами — метгемоглобин (гемоглобин, содержащий трехвалентное окисное железо), с сульфаниламидами — сульфгемоглобин, которые неспособны переносить кислород.

Количество гемоглобина определяют колориметрическими методами с использованием гемометра ГС-3, гемоглобинометров, электрического анализатора крови ФАК-01, фотоэлектроколориметров и спектрофотометров. В качестве стандартного рекомендован гемиглобинцианидный метод по JI. М. Пименовой и Г. В. Дер-виз (с ацетонциангидрином). Содержание гемоглобина в крови здоровых животных приведено в таблице 9.10.

9.10. Количество гемоглобина в крови животных разных видов

Вид животного

Гемоглобин

Вид животного

Гемоглобин

г/100 мл

г/л

г/100 мл

г/л

Крупный рогатый скот

9,9…12,9

99…29

Песец

12,0…17,0

120-170

Овца

9,0…13,3

90…133

Норка

15,0…17,5

150…175

Коза

10,0…15,0

100.. .150

Соболь

13,0…16,0 130…160

Верблюд

13,0…14,5

130…145

Куница

12,2…19,5

122…195

Северный олень

11,0…14,0

110…140

Кролик

10,5…12,5

105…125

Буйвол

4,7…11,7

47…117

Морская

12,0-16,0 120…160

 

 

 

свинка

 

 

 

Як

6,0…13,0

60…130

Крыса белая

13,0-19,0

130…190

Лось

14,0…18,0

140…180

Мышь белая

14,0-18,0

140-180

Марал

12,1…17,7

121…177

Хомячок

11,0-15,6

110…156

 

 

 

золотистый

 

 

 

Продолжение

Вид животного

 

Гемоглобин

 

Вид

животного

Гемоглобин

г/100 мл

г/л

г/100 мл

г/л

Лошадь

8,0..

.14,0

so-

140

Еж

12,0.

..14,0

120.

.140

Осел

14,0.

.16,0

ho.

.160

Курица

8,0..

.12,0

80..

120

Мул

14,0.

.17,0

140.

.170

Гусь

9,0..

.13,5

90..

135

Свинья

9,0..

.11,0

90..

110

Утка

10,0.

.12,5

100.

.125

Собака

11,0.

.17,0

110.

.170

Голубь

10,0.

.17,0

100.

.170

Кошка

10,0.

.14,0

100.

.140

Индейка

7,0..

.11,0

70..

110

Лисица серебристо-черная

12,0.

.16,0

120.

.160

Цесарка

8,0..

12,0

80..

120

 

 

 

 

 

Лягушка

6,6.

.8,5

65..

.85

Количество метгемоглобина и сульфгемоглобина определяют спектрофотометрическим методом (с ацетонциангидрином и железосинеродистым калием) по М. С. Кушаковскому.

В клинической практике чаще наблюдают снижение содержания гемоглобина в крови — олигохромемию, которая может быть при анемиях, обусловленных острыми и хроническими кровотечениями, дефицитом железа, витамина В12 и фолиевой кислоты, гемолизом эритроцитов при пироплазмидозах, алиментарном истощении, ряде инфекционных болезней.

Увеличение количества гемоглобина — гиперхромемия — встречается при поносах, повышенной потливости, обильной рвоте, образовании транссудатов и экссудатов, миоглобинурии лошадей, эмфиземе легких, кровопятнистой болезни лошадей и при некоторых видах колик (непроходимость кишечника).

В норме в крови содержание метгемоглобина у крупного рогатого скота составляет (по В. С. Кондратьеву) 0,0…0,1 г/100 мл (0…1 г/л), а сульфгемоглобина — 0,04…0,2 г/100 мл (0,4…2 г/л). Концентрация метгемоглобина повышается при клинических и субклинических отравлениях животных нитратами и нитритами (поступающими с кормами, питьевой водой), салицилатами, сульфаниламидными препаратами, а содержание сульфгемоглобина увеличивается при хронических, упорных запорах, отравлениях серосодержащими лекарственными препаратами (сульфаниламидами ит. д.).

Определение цветового показателя и среднего содержания гемоглобина в эритроците. Нередко в клинической практике определяют индексы красной крови. Чаще вычисляют цветовой показатель, среднее содержание и концентрацию гемоглобина в одном эритроците, реже — средний объем эритроцита и средний диаметр эритроцитов. По уровню гемоглобина и числу эритроцитов в крови не всегда удается решить вопрос о характере анемии у животного, так как содержание гемоглобина может уменьшаться значительнее, чем число эритроцитов; в других случаях, наоборот, при выраженном уменьшении количества эритроцитов концентрация гемоглобина мало изменяется. Таким образом, при заболеваниях с одним и тем же числом красных кровяных телец наблюдают различное содержание гемоглобина, что, естественно, связано с различной насыщенностью эритроцитов гемоглобином.

В норме цветовой показатель у животных колеблется в следующих пределах (табл. 9.11).

9.11. Цветовой показатель кровп п среднее количество содержания гемоглобина в одном эритроците у животных разных видов

Вид животного

Цветовой показатель

Среднее содержание гемоглобина (пг; 1 х 10~’г г)

Крупный рогатый скот

0,7…1,1

16,5…18,5

Овца

0,5…0,7

10,0…13,0

Свинья

0,8…1,0

16,0…19,0

Лошадь

0,8…1,2

17,0…20,0

Собака

0,8…1,2

19,0…23,0

Кошка

0,7…1,1

17,0…20,0

Кролик

0,8.-1,0

21,0…23,0

Курица

2,0…3,0

36,0…40,0

Отклонение цветового показателя от нормы на 15 % и более свидетельствует о нарушении состава крови, что учитывают при дифференцировании анемии.

Увеличение цветового показателя — гиперхромемию — наблюдают при гемолитических анемиях. Уменьшение цветового показателя — гипохромемия — характерный признак постгеморрагичес-ких и железодефицитных анемий.

На основе цветового показателя и среднего содержания гемоглобина в отдельном эритроците анемии разделяют на нормо-, гипо- и гиперхромные. Если цветовой показатель и МСН в пределах нормы, то это нормохромия. Однако она может встречаться и при некоторых анемиях (острые постгеморрагические и гемолитические, гипо- и апластические).

Увеличение среднего содержания гемоглобина в одном эритроците в сочетании с повышением цветового показателя (в этом случае увеличивается объем эритроцитов — макроцитоз, но насыщенность их гемоглобином не изменяется) обозначают как ги-перхромию. Такое состояние встречается при хронических гемолитических, миелотоксических анемиях, при В12 — витаминной недостаточности.

Снижение цветового показателя — гипохромия — может встречаться при уменьшении объема эритроцитов (микроцитоз) или при пониженной насыщенности гемоглобином нормальных по размеру эритроцитов, что наблюдают при железодефицитной анемии.

Среднюю концентрацию гемоглобина в эритроците (МСНС — mean corpuscular hemoglobin concentration) вычисляют no следующей формуле:

МСНС = Гемоглобин ■ 100/Гематокрит (%).

Этот индекс показывает соотношение содержания гемоглобина и объема клетки, а также насыщение эритроцита гемоглобином. Определение данного индекса служит чувствительным тестом при нарушении процессов гемоглобинообразования. МСНС особо информативен при железодефицитных анемиях; показатель снижается также при макроцитарных и особенно при мегалоцитарных анемиях, когда объем эритроцитов увеличен непропорционально увеличению насыщения эритроцитов гемоглобином.



Источник: www.kievoncology.com


Добавить комментарий